Question

3．自生固氮菌可不與其它植物共生，能獨(dú)立完成固氮作用，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的用途．研究人員從土壤中篩選高效的自生固氮菌株，并對(duì)其固氮能力進(jìn)行了研究．
請(qǐng)回答下列問題：
（1）在配制含瓊脂的培養(yǎng)基和倒平板的過程中，下列選項(xiàng)不需要的是②（填序號(hào)）
①酒精燈�、诮臃N環(huán)�、鄹邏赫羝麥缇�鍋　④棉塞
（2）要從土壤樣品中分離出自生固氮菌，在獲得土壤浸出懸液后，可以采用稀釋涂布平板法將菌液涂布于缺氮培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選．
（3）在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．
（4）涂布培養(yǎng)四天后，可通過觀察菌落的形態(tài)特征來統(tǒng)計(jì)土壤中自身固氮菌的種類．
（5）為了進(jìn)一步篩選高效固氮菌，研究人員將上述獲得的等量的四種固氮菌分別接種到等量的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)相同時(shí)間后，對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)并測(cè)定培養(yǎng)液中的含氮量，結(jié)果如表：

	甲菌	乙菌	丙菌	丁菌
菌量（個(gè)/mL）	2.1×105	2.5×105	1.8×105	2.0×105
含氮量（K）	3.32	4.38	5.34	5.32

①培養(yǎng)過程中需不斷振蕩的目的是讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸．
②可以采用抽樣檢測(cè)方法對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，假設(shè)計(jì)數(shù)室長和寬均為1mm，深0.1mm，每個(gè)小方格中平均有7個(gè)固氮菌，則10mL培養(yǎng)液中有固氮菌的數(shù)量為2.8×10⁸個(gè)；如果小方格中固氮菌的數(shù)量太多，無法數(shù)清，則應(yīng)對(duì)培養(yǎng)液稀釋后計(jì)數(shù)．
③由上述結(jié)果可知，丙菌的固氮效率最高．

Answer 1

分析 1、細(xì)菌菌落特征：菌落較小，形狀表面或光滑黏稠，或粗糙干燥，易挑起，多為白色；而真菌落特征：菌落較大、菌絲細(xì)長，菌落疏松，呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀、棉絮狀，無固定大小，多有光澤，不易挑，有時(shí)還呈現(xiàn)紅色、褐色、綠色、黑色、黃色等不同的顏色（孢子的顏色）．
2、自生固氮菌是指在土壤中能夠獨(dú)立進(jìn)行固氮的細(xì)菌，可以利用氮?dú)庾鳛榈�源，所以培養(yǎng)基中不需要加氮源．

解答 解：（1）平板培養(yǎng)基配制的基本流程為：：計(jì)算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)PH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板，不需要接種環(huán)接種．故選：②．
（2）對(duì)微生物進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)，應(yīng)該用稀釋涂布平板法．自生固氮菌是指在土壤中能夠獨(dú)立進(jìn)行固氮的細(xì)菌，所以培養(yǎng)基中不需要加氮源．
（3）由于培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，因此在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌液量不宜過多．
（4）用肉眼來觀察并鑒定細(xì)菌的依據(jù)是菌落的形態(tài)、大小和顏色．因此可通過應(yīng)用固體培養(yǎng)基，觀察菌落形態(tài)的形態(tài)特征來統(tǒng)計(jì)土壤中自身固氮菌的種類．
（5）①為了讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸，在培養(yǎng)過程中需不斷振蕩．
②對(duì)固氮菌進(jìn)行計(jì)數(shù)可以采用抽樣檢測(cè)方法，假設(shè)計(jì)數(shù)室長和寬均為1mm，深0.1mm，每個(gè)小方格中平均有7個(gè)固氮菌，則10mL培養(yǎng)液中有固氮菌的數(shù)量為=7×400×10⁴×10=2.8×10⁸個(gè)；如果小方格中固氮菌的數(shù)量太多，無法數(shù)清，則應(yīng)對(duì)培養(yǎng)液稀釋后計(jì)數(shù)．
③由上述結(jié)果可知，丙菌數(shù)量最少，但固氮量最多，因此可判斷出丙菌的固氮效率最高．
故答案為：
（1）②
（2）缺氮
（3）培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果
（4）菌落
（5）①讓固氮菌與培養(yǎng)液充分接觸　②抽樣檢測(cè)　2.8×10⁸　對(duì)培養(yǎng)液稀釋后計(jì)數(shù)�、郾�

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是選擇培養(yǎng)基的選擇作用、菌落的計(jì)算方法，主要考查學(xué)生運(yùn)用微生物培養(yǎng)的知識(shí)解決生活中問題的能力．