Question

【題目】轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖1所示，圖2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）圖中限制酶切割DNA時(shí)破壞的是兩個(gè)_____________之間的化學(xué)鍵。

（2）在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時(shí)要保證目的基因被連接在質(zhì)粒上特定的_____________和終止子之間才能保證目的基因在受體細(xì)胞中被成功________。

（3）將抗病基因從含抗病基因的DNA中切割下來(lái)，使用的限制酶是______________，同時(shí)也應(yīng)該用相同的酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，這樣處理的原因是________________________________。請(qǐng)寫(xiě)出單獨(dú)用PstⅠ切割質(zhì)粒后的片段：______________________________________。

（4）轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育是否發(fā)生了可遺傳變異？______________。

Answer 1

【答案】脫氧(核糖)核苷酸 啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄（或者填表達(dá)） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割質(zhì)粒才能產(chǎn)生與目的基因相同的末端，便于二者進(jìn)行拼接 和 是

【解析】

分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育流程圖，首先采用基因工程技術(shù)得到含有目的基因的受體細(xì)胞（獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體、采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)）；其次采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。

（1）限制酶特異性識(shí)別DNA中特定的核苷酸序列，切斷兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時(shí)要保證目的基因被連接在質(zhì)粒上特定的啟動(dòng)子和終止子之間才能保證目的基因在受體細(xì)胞中被成功轉(zhuǎn)錄。

（3）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶Sma I的切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割含有目的基因的外源DNA分子時(shí)會(huì)破壞目的基因，所以選限制酶Pst I和EcoRI對(duì)目的基因進(jìn)行切割，這樣不會(huì)對(duì)目的基因造成破壞。故使用這兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。用相同的酶切割質(zhì)粒才能產(chǎn)生與目的基因相同的末端，產(chǎn)生相同的黏性末端，便于二者進(jìn)行拼接。質(zhì)粒會(huì)被限制酶Pst l、Sma I、EcoR I同時(shí)切割成三段，EcoR I、Pst l切割質(zhì)粒形成的是黏性末端，且每種酶切割質(zhì)粒后會(huì)形成兩個(gè)黏性末端，Sma I切割形成的是平末端，所以三種限制酶切割質(zhì)粒會(huì)形成四個(gè)黏性末端。根據(jù)圖2顯示，可以推出單獨(dú)用PstⅠ切割質(zhì)粒后的片段：和。

（4）轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育原理是基因重組，發(fā)生了可遺傳變異。