人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322是基因工程中應(yīng)用最廣泛的載體（見圖1）。除標(biāo)注外，圖中其他英文縮寫表示該質(zhì)粒上不同的限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答：













（1）此質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是　　　　　 ，它可以作為多種目的基因的（運(yùn)）載體，原因是　　　　　 。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是　　　　　　 。

（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個(gè)氨基酸組成，如圖2所示。


①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時(shí)，可先依據(jù)　　　　　　 推出

　　　　　 序列，再推出　　　　　 序列，然后用化學(xué)方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與　　　　　　 重組后，再導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)。

② 在大腸桿菌內(nèi)合成的單獨(dú)的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因?yàn)榧?xì)菌中缺少　　　　　 ，不能　　　　　　 。若要直接獲得有活性的轉(zhuǎn)基因人胰島素，可以選擇　　　　　　 作為受體細(xì)胞。

（1）DNA （核酸不給分，大腸桿菌的質(zhì)粒只是DNA）      

含有多種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn) （外加載體的其它條件不錯(cuò)給分，錯(cuò)不給分）

（2）① 氨基酸的排列順序（A鏈、B鏈的一級(jí)結(jié)構(gòu)給分） 

　　　　信使RNA的堿基（核糖核苷酸的排列序列給分）   

DNA（基因、）的堿基（脫氧核糖核苷酸給分）     

不同質(zhì)粒（２個(gè)質(zhì)粒）

② 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器（答出任何一個(gè)內(nèi)容均可得分，只答線粒體不給

　　分，但如果與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體任何一個(gè)細(xì)胞器給分）   

對(duì)多肽鏈進(jìn)行加工（添加形成二硫鍵；形成空間結(jié)構(gòu)不給分，因大腸桿菌也　

形成空間結(jié)夠）      

真核細(xì)胞（酵母菌）（人的瘤細(xì)胞給分）

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源：2012屆北京市西城區(qū)高三上學(xué)期期末考試生物試卷 題型：綜合題

（10分）人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322是基因工程中應(yīng)用最廣泛的載體（見圖1）。除標(biāo)注外，圖中其他英文縮寫表示該質(zhì)粒上不同的限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答：

（1）此質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是          ，它可以作為多種目的基因的（運(yùn)）載體，原因是          。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是            。
（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個(gè)氨基酸組成，如圖2所示。

①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時(shí)，可先依據(jù)            推出
           序列，再推出          序列，然后用化學(xué)方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與            重組后，再導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)。
② 在大腸桿菌內(nèi)合成的單獨(dú)的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因?yàn)榧?xì)菌中缺少           ，不能            。若要直接獲得有活性的轉(zhuǎn)基因人胰島素，可以選擇             作為受體細(xì)胞。

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科目：高中生物 來源：2013年上海市普陀區(qū)高三高考二模生物試卷 題型：綜合題

研究人員利用基因工程技術(shù)對(duì)肺癌的治療進(jìn)行了大量研究，肺部細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖所示，據(jù)圖回答

1.在基因工程中通常選擇細(xì)菌質(zhì)粒作為載體，原因是                          ；如果某質(zhì)粒由100 0個(gè)脫氧核苷酸組成，脫氧核苷酸平均分子量為a,則該質(zhì)粒的質(zhì)量為        。

2.圖甲中在構(gòu)建重組載體時(shí)，酶切目的基因和酶切質(zhì)粒時(shí)，所用的限制酶可以不同，但是產(chǎn)生的粘性末端必須是                。

3.圖甲中在將酶切后的目的基因?qū)氲矫盖泻蟮馁|(zhì)粒上時(shí)需要的酶是              ， 圖乙中l(wèi)et-7基因轉(zhuǎn)錄過程需要的酶是    ，這 兩種酶作用的化學(xué)鍵都是          。

4.EcoR I限制酶只能識(shí)別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoR I的切點(diǎn)，請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。                      

5.原代培養(yǎng)是是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。原代培養(yǎng)隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長和細(xì)胞不斷分裂，空間因素和營養(yǎng)因素會(huì)限制其進(jìn)一步生長。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分（組織細(xì)胞分散開），重新接種到另外的培養(yǎng)器皿內(nèi)再進(jìn)行培養(yǎng)，這個(gè)過程就稱為傳代或者再培養(yǎng)。圖甲中進(jìn)行傳代培養(yǎng)操作時(shí)，需要用　　 　　酶處理貼附在原代培養(yǎng)培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于傳代培養(yǎng)。

6.研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS基因的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖乙所示。從分子水平的角度分析，其作用機(jī)理是　　                               　    　。

7.下圖所示pBR322是目前常用的人工質(zhì)粒載體。如果將BamHI處理后的pBR322質(zhì)粒與用BgIⅡ處理得到的目的基因進(jìn)行重組，并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入原本無ampR和tetR  的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。為了檢測重組質(zhì)粒是否成功導(dǎo)入大腸桿菌，現(xiàn)將上述大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對(duì)照無菌落的位置)。與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___       _____ ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌內(nèi)導(dǎo)入的是___            __。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆海南省高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

目前所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖所示。

 

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因，以便于                               。

(2)pBR322分子中有單個(gè)EcoR I限制酶作用位點(diǎn)，EcoR 1只能識(shí)別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoR I的切點(diǎn)，請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。

                                                                      

(3)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復(fù)___     ___ 鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒。

 (4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對(duì)照無菌落的位置)。與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___       _____ ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是___            __。

 

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科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年北京市西城區(qū)高三上學(xué)期期末考試生物試卷 題型：綜合題

（10分）人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322是基因工程中應(yīng)用最廣泛的載體（見圖1）。除標(biāo)注外，圖中其他英文縮寫表示該質(zhì)粒上不同的限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答：

（1）此質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是           ，它可以作為多種目的基因的（運(yùn)）載體，原因是           。ampr和tetr在基因工程中的主要作用是             。

（2）人胰島素由兩條肽鏈共有51個(gè)氨基酸組成，如圖2所示。

 

①通過基因工程培育能合成人胰島素的工程菌時(shí)，可先依據(jù)             推出

            序列，再推出           序列，然后用化學(xué)方法人工合成A鏈和B鏈基因的片段。將此基因片段分別與             重組后，再導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)。

② 在大腸桿菌內(nèi)合成的單獨(dú)的A、B兩條多肽鏈沒有生物活性，是因?yàn)榧?xì)菌中缺少            ，不能             。若要直接獲得有活性的轉(zhuǎn)基因人胰島素，可以選擇              作為受體細(xì)胞。

 

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