Question

20．回答與微生物分離有關(guān)的問(wèn)題：
由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）．

（1）圖甲中，過(guò)程①需要的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶．為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源．②、③過(guò)程需要重復(fù)幾次，目的是進(jìn)一步篩選純化獲得進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌．
（2）某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是涂布不均勻．
（3）上述工程酵母菌培養(yǎng)過(guò)程中，有關(guān)操作正確的是C．
A．玻璃刮刀和接種環(huán)一樣，只需灼燒滅菌
B．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌
C．倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行
D．獲得的菌種如果需要保存，可置于37℃恒溫保存．

Answer 1

分析 分析圖甲：圖甲是將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的過(guò)程．圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；②、③過(guò)程重復(fù)幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌．
分析圖乙：圖乙是一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布，可見(jiàn)其采用的是稀釋涂布平板法，但圖中群落分布相對(duì)較集中．

解答 解：（1）圖甲過(guò)程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程先要用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和質(zhì)粒，再用DNA連接酶將目的基因和載體連接起來(lái)形成重組質(zhì)粒．普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，而工程酵母菌可以高效利用淀粉，所以用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以選出工程酵母菌．②、③過(guò)程重復(fù)幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌．
（2）由圖乙可知，該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒(méi)有很好的分散開來(lái)，可能是涂布不均勻?qū)е碌模?br />（3）A、玻璃刮刀需先用70%的酒精消毒，然后再灼燒滅菌，A錯(cuò)誤；
B、培養(yǎng)基先進(jìn)行滅菌后分裝到培養(yǎng)皿，B錯(cuò)誤；
C、倒平板和取菌液都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行，C正確；
D、獲得的菌種如果需要保存，若臨時(shí)保存則置于4℃溫度下保持，若長(zhǎng)期保存則置于-20℃溫度下保存，D錯(cuò)誤．
故選：C．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶    淀粉     進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌   
（2）稀釋涂布平板法    涂布不均勻  
（3）C

點(diǎn)評(píng) 本題以工程菌為素材，結(jié)合圖表綜合考查基因工程、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、果酒制作、培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的變化，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟；識(shí)記微生物的接種方法，能根據(jù)圖乙判斷接種方法及圖乙現(xiàn)象出現(xiàn)的原因．