【題目】回答下列(一)、(二)小題:

(一)蘋果可以制作成蘋果汁、蘋果酒和蘋果醋等多種產(chǎn)品,深受大眾喜愛。

1)在榨取蘋果汁時,往往添加適量的黑曲霉提取液,其中含有的_________可水解果膠,從而使果汁澄清。在純化所需黑曲霉時,采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時間后,發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷長滿菌落,第二劃線區(qū)域幾乎無菌落,此現(xiàn)象出現(xiàn)的原因可能是_______________。純化得到的菌種可用劃線法接種于_______,培養(yǎng)一定時間后保存。

2)制備好的的蘋果汁可用于制作蘋果酒。發(fā)酵一定時間后,觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面_______,說明發(fā)酵基本完畢。果酒釀造過程中,即使含有醋桿菌,在酒精發(fā)酵旺盛時,醋桿菌不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋,理由是____________。

3)蘋果酒可用于制備蘋果醋,在制備果醋時使用了優(yōu)良菌種,且流入發(fā)酵罐的蘋果酒質(zhì)量很好,但是生產(chǎn)的蘋果醋產(chǎn)量和質(zhì)量不夠高,排除溫度和 PH 以外的原因可能是 ____(寫二點(diǎn))。

4)下列關(guān)于果酒、果醋制作的敘述,錯誤的是____

A 制作果酒過程中,發(fā)酵罐放氣的頻率呈先升高后降低的趨勢

B 控制好溫度和酸堿度既有利于目的菌的繁殖,又可抑制雜菌的生長

C 制作果酒和果醋的微生物呼吸類型不完全相同

D 發(fā)酵過程中所有材料都需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理,以免雜菌污染

(二)如圖所示為質(zhì)粒B和一個含目的基因的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,lacZ為藍(lán)色顯色基因(能使含該基因的大腸桿菌菌落呈藍(lán)色)。圖中EcoRⅠ、PvuⅠ為兩種限制酶,括號內(nèi)的數(shù)字表示限制酶切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離。請據(jù)圖分析并回答問題:

1)外源基因在受體細(xì)胞中能啟動表達(dá)的關(guān)鍵是載體上具有_________識別和結(jié)合的部位。

2)將用限制酶_____切開的質(zhì)粒B溶液與目的基因溶液混合,加入DNA連接酶連接后,導(dǎo)入大腸桿菌。為了便于篩選,作為受體細(xì)胞的大腸桿菌自身______(含/不含)lacZ基因和_____(有/沒有)氨芐青霉素抗性。導(dǎo)入后應(yīng)從_____________兩個角度對受體細(xì)胞進(jìn)行篩選。

3)將獲得的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ完全酶切并進(jìn)行電泳觀察,若出現(xiàn)長度為 31 kb ____kb的片段,則載體和目的基因反向連接。若出現(xiàn)長度為_____kb ___kb的片段,則載體和目的基因正向連接。(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRⅠ的識別位點(diǎn)之間的堿基對忽略不計)

【答案】果膠酶 接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線或未從第一區(qū)域末端開始劃線 培養(yǎng)基 不再有氣泡冒出 醋桿菌是好氧細(xì)菌,而果酒發(fā)酵為無氧環(huán)境,醋桿菌無法生存 醋桿菌數(shù)目較少,氧氣量不夠,流速控制不好,有雜菌侵入等 D RNA聚合酶 Pvu 不含 沒有 菌落的顏色和對氨芐青霉素的抗性 3.6 1.1 5.6

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2、分析題圖:如圖所示為質(zhì)粒和一個含目的基因的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,lacZ為藍(lán)色顯色基因。EcoRI0.7Kb)、Pvu I0.8Kb)等為限制酶及其切割的位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離。

(一)(1)黑曲霉提取液中含有的果膠酶可水解果膠,從而使果汁澄清。采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時間后,發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷地長滿了菌落,第二劃線區(qū)域上幾乎無菌落,出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線或未從第一區(qū)域末端開始劃線。純化得到的菌種可用劃線法接種于適宜生長的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一定時間后保存。

2)發(fā)酵一定時間后,觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出,說明發(fā)酵基本完畢。醋桿菌是好氧細(xì)菌,而果酒發(fā)酵為無氧環(huán)境,醋桿菌無法生存,所以果酒釀造過程中,即使含有醋桿菌,在酒精發(fā)酵旺盛時,醋桿菌也不能將果汁中的糖發(fā)酵為醋。

3)在制備果醋時使用了優(yōu)良菌種,且流入發(fā)酵罐的蘋果酒質(zhì)量很好,但是生產(chǎn)的蘋果醋產(chǎn)量和質(zhì)量不夠高,排除溫度和pH以外的原因可能是醋桿菌數(shù)目較少,氧氣量不夠,流速控制不好,有雜菌侵入等。

4A、制作果酒過程中,產(chǎn)生二氧化碳速率先較快后減慢,故發(fā)酵罐放氣的頻率呈先升高后降低的趨勢,A正確;

B、控制好溫度和酸堿度既有利于目的菌的繁殖,又可抑制雜菌的生長,B正確;

C、制作果酒的酵母菌及進(jìn)行有氧呼吸,又進(jìn)行無氧呼吸,制作果醋的微生物只進(jìn)行有氧呼吸,C正確;

D、傳統(tǒng)發(fā)酵過程中只進(jìn)行消毒處理,沒有進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理,D錯誤。

故選D。

(二)(1)外源基因在受體細(xì)胞中能啟動表達(dá)的關(guān)鍵是載體上具有啟動子,即RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。

2)據(jù)圖可知,目的基因兩端具有限制酶PvuⅠ的切點(diǎn),故用限制酶PvuⅠ切開的質(zhì)粒B溶液與目的基因溶液混合,加入DNA連接酶連接后可形成重組質(zhì)粒,再導(dǎo)入受體細(xì)胞。為了便于篩選,作為受體細(xì)胞的大腸桿菌自身不含lacZ基因和沒有氨芐青霉素抗性。導(dǎo)入后應(yīng)從菌落的顏色和對氨芐青霉素的抗性兩個角度對受體細(xì)胞進(jìn)行篩選。

3)析圖可知,目的基因上存在著EcoRI酶的切割位點(diǎn),構(gòu)建重組質(zhì)粒時使用Pvul,重組質(zhì)粒長度為2.7+4=6.7kb,目的基因可正向或反向連接到質(zhì)粒上。使用EcoRl切割之后進(jìn)行電泳檢測。若載體和目的基因正向連接,則電泳圖譜中出現(xiàn)長度為1.1kb0.8-0.7+1.0)和5.6kb[2.7-0.8-0.7+4.0-1.0],若載體和目的基因反向連接,則電泳圖譜中出現(xiàn)長度為3.1kb[0.8-0.7+3.0]3.6kb[2.7-0.8-0.7+1.0]的片段。

練習(xí)冊系列答案
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1)圖甲中器官A______,甲狀腺激素能作用于幾乎全身所有的細(xì)胞,原因是這些細(xì)胞具有__________。

2)圖乙中②是反射弧結(jié)構(gòu)中的_______。在b點(diǎn)給一個足夠強(qiáng)的刺激后,在a、c兩點(diǎn)可測到膜電位變化的是__________點(diǎn),說明興奮在神經(jīng)元之間是單向傳遞的。

3)若圖乙中效應(yīng)器是胰島,則人體進(jìn)食后,血糖濃度升高,結(jié)果是____________________

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C.與該細(xì)胞來自同一個親代細(xì)胞的另一個細(xì)胞中最多含有6條染色體

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A. 圖中②③④的結(jié)構(gòu)均不相同

B. 與注射相比,口服葡萄糖會使體內(nèi)胰島素水平更高

C. GIP能促進(jìn)葡萄糖進(jìn)人脂肪細(xì)胞并轉(zhuǎn)化為脂肪

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C. 過程耗氧速率低的主要原因是[H]不足

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C.左移載玻片可使箭頭所指細(xì)胞移至視野中央

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