Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力，科學(xué)家將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中需要通入CO2，作用是_________。

（2）為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。

（3）采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水，4種脫氧核苷酸、模板DNA、能量、____和______。

（4）利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼滿瓶壁的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生________現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大_________，從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 維持pH值的穩(wěn)定 啟動(dòng)子 終止子 TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶） 引物 接觸抑制 增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積

【解析】試題分析：梳理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程的相關(guān)知識(shí)，從題意中提取有效信息，進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。

(1)為使動(dòng)物組織分散開(kāi)，獲得單個(gè)細(xì)胞，通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞過(guò)程中，培養(yǎng)液中通入的CO2的作用是：維持pH值的穩(wěn)定。

(2)啟動(dòng)子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端 ，因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和 終止子之間。

(3) 采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴(kuò)增緩沖液（含Mg2+）、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA、能量、TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）和引物。

(4) 動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，貼滿瓶壁的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積，從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。