Question

【題目】人血清白蛋白（HSA）具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。如圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。請回答：

（1）獲取HSA基因的方法有______________、_____________、_____________。若需要獲得cDNA則首先需采集人的血液，提取血液中的_________。然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。

（2）下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出標出另一條引物的位置及擴增方向。

______________

（3）啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母）。

A.人血細胞啟動子 B.水稻胚乳細胞啟動子 C.大腸桿菌啟動子 D.農桿菌啟動子

（4）利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，其目的是_______________。農桿菌中含有Ti質粒，其上有一段TDNA，這段DNA的作用是_______________________。

（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認rHSA與______________的生物學功能一致。

Answer 1

【答案】從基因文庫中獲取 PCR技術擴增 人工合成 RNA(或mRNA) B 吸引農桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉化 將目的基因轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體DNA上 HSA

【解析】

基因工程的操作步驟：獲取目的基因（基因文庫、PCR、人工合成）；構建基因表達載體（含標記基因、啟動子、終止子、目的基因、復制原點等）；把目的基因導入受體細胞（顯微注射法、農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測和鑒定（分子水平和個體水平檢測，前者包括DNA分子雜交、分子雜交和抗原抗體雜交；后者如抗蟲抗病接種實驗）。

（1）獲取HSA基因可以通過從基因文庫獲取、PCR擴增、人工合成等方法獲取HSA基因。HSA只能在血漿中制備，故若需要獲得cDNA，則需要先提取血液中的RNA，通過反轉錄合成cDNA，再采用PCR技術擴增HSA基因。

（2）根據兩條鏈反向平行可知，另一條引物的結合位點應該在下面一條鏈的右側，即。

（3）要讓目的基因在水稻的胚乳細胞中表達，需要在目的基因的前面加上水稻胚乳細胞基因的啟動子。

綜上所述，ACD不符合題意，B符合題意。

故選B。

（4）常用農桿菌轉化法將目的基因導入水稻細胞中，酚類物質吸引農桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉化。農桿菌中含有Ti質粒，其上有一段T-DNA，將目的基因轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體DNA上，故需要將目的基因插入到T-DNA上。

（5）rHSA是通過基因工程技術獲得的，可以通過比較rHSA與HSA的生物學功能是否一致，來確定rHSA的醫(yī)學價值。