Question

16．如圖表示轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過(guò)程，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）如果用馬鈴薯發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種cDNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體菌群就叫做馬鈴薯的cDNA（部分基因）文庫(kù)．
（2）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，用Pst、EcoR I酶對(duì)含目的基因的DNA和質(zhì)粒同時(shí)進(jìn)行處理．
（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有啟動(dòng)子和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞后，采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的染色體的DNA上是否插入了目的基因，同時(shí)還要采用抗原-抗體雜交 技術(shù)檢測(cè)目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細(xì)胞中表達(dá)．
（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加的物質(zhì)是植物激素，添加卡那霉素的作用篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過(guò)程，首先獲取目的基因（抗原基因）；其次構(gòu)建基因表達(dá)載體；再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株．

解答 解：（1）用馬鈴薯發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種cDNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體菌群就叫做馬鈴薯的cDNA文庫(kù)．
（2）含有目的基因的外源DNA分子中含有三種限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割會(huì)破壞目的基因，因此構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)使用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ．
（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有啟動(dòng)子和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞后，檢測(cè)目的基因是否插入馬鈴薯染色體的DNA上可采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測(cè)目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細(xì)胞中表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加植物激素（細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素）；由圖可知，抗卡那霉素基因?yàn)榭剐曰�因，因此培養(yǎng)基中添加卡那霉素的作用是篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞．
故答案為：
（1）多種cDNA　  cDNA（部分基因）文庫(kù)     
（2）Pst、EcoR I
（3）啟動(dòng)子　  DNA分子雜交  　染色體的DNA　   抗原-抗體雜交
（4）植物激素　   篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過(guò)程圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理、過(guò)程及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．