Question

15．下列關(guān)于利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因抗蟲植物的敘述，錯(cuò)誤的是（　�。�

• A． 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，該過程中需要使用限制酶和DNA鏈接酶
• B． 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法通常適用于傷口處細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物的植物
• C． 將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前，常用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞
• D． 用DNA分子雜交法檢測(cè)目的基因已插入染色體DNA上，則說明轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)成功

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA，A正確；
B、農(nóng)桿菌能受植物傷口處的細(xì)胞分泌的大量酚類化合物吸引，并移向這些細(xì)胞，所以農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法通常適用于傷口處細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物的植物，B正確；
C、將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前，常用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)受體細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程，C正確；
D、用DNA分子雜交法檢測(cè)目的基因已插入染色體DNA上，則說明導(dǎo)入成功；植物表現(xiàn)出抗蟲特性，則說明轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)成功，D錯(cuò)誤．
故選：D．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，了解基因工程技術(shù)的安全性問題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．