Question

【題目】為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化，某研究性學(xué)習(xí)小組按下表完成了有關(guān)實(shí)驗(yàn)。

試管編號(hào)	培養(yǎng)液/mL	無菌水/mL	酵母菌母液/mL	溫度（℃）
A	10	-	0.1	20
B	10	-	0.1	5
C	-	10	0.1	20

（1）該實(shí)驗(yàn)探究的是_______________對(duì)酵母菌種群數(shù)量變化的影響。

（2）本實(shí)驗(yàn)中，某學(xué)生的部分實(shí)驗(yàn)操作過程如下：

①將A、B、C三支試管放置在表中相應(yīng)的溫度、其它條件適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，第一天開始取樣計(jì)數(shù)，連續(xù)七天； ②用無菌吸管從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液少許；

③加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室，再蓋上蓋玻片，并用濾紙吸去多余菌液。

請(qǐng)糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的兩個(gè)錯(cuò)誤。①________________________；②________________________。

（3）若吸取酵母菌樣液1mL并稀釋100倍，采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm x lmm x 0．lmm，由400個(gè)小格組成）計(jì)數(shù)，下圖表示一個(gè)中方格中酵母菌的分布情況，以該中方格為一個(gè)樣方，計(jì)數(shù)結(jié)果是酵母菌有________個(gè)。如果計(jì)數(shù)的中方格酵母菌平均數(shù)為18個(gè)，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)為____________個(gè)。

Answer 1

【答案】營養(yǎng)、溫度 取樣前振蕩試管 先蓋上蓋玻片，再加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室 15 2．88×108

【解析】

酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長(zhǎng)情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時(shí)間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目。

（1）根據(jù)題意和圖表分析可知：實(shí)驗(yàn)自變量有培養(yǎng)液與無菌水、溫度有20℃和5℃，所以該實(shí)驗(yàn)探究的是營養(yǎng)和溫度對(duì)酵母菌種群數(shù)量變化的影響。

（2）①培養(yǎng)過程中，酵母菌可能會(huì)沉在試管底部，如果取樣取的是試管底部，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)則會(huì)偏大，如果取樣取的是試管上部，則實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)則會(huì)偏小，因此制片前要輕輕震蕩試管使酵母菌分布均勻。

②在制作臨時(shí)裝片，應(yīng)先蓋上蓋玻片，然后沿著蓋玻片的邊緣滴一滴培養(yǎng)液，讓培養(yǎng)液慢慢自行滲入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室。

（3）估算培養(yǎng)液中酵母菌種群密度的常用方法稱為抽樣檢測(cè)法．酵母菌在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)原則為“計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右”，因此計(jì)數(shù)相鄰兩邊，計(jì)數(shù)結(jié)果是酵母菌有15個(gè)．如果計(jì)數(shù)的中方格酵母菌平均數(shù)為18個(gè)，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)=18÷25×400×104×100=2.88×108個(gè)。