Question

2．研究人員用四倍體馬鈴薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍體馬鈴薯（2n=24）進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育抗青枯病的馬鈴薯．
（1）研究人員用四倍體馬鈴薯的葉片探究原生質(zhì)體制備條件，結(jié)果如表所示：

組別	酶的種類	酶的濃度 （%）	原生質(zhì)體產(chǎn)量 （×106個(gè)/g）	鏡檢結(jié)果
1	纖維素酶	1.0	0.4	未解離的細(xì)胞團(tuán)多
	果膠酶	0.5
2	纖維素酶	1.0	0.08	有許多碎片
	果膠酶	1.0
3	纖維素酶	0.5	1.5	未完全解離
	果膠酶	0.5
4	纖維素酶	0.5	3.4	解離較好，細(xì)胞破碎嚴(yán)重
	果膠酶	1.0
5	纖維素酶	0.4	18.8	解離充分，碎片少
	果膠酶	0.7

①據(jù)表分析，制備原生質(zhì)體的最佳組合是第5組，葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度．
②制備的原生質(zhì)體應(yīng)置于濃度略高于馬鈴薯葉片細(xì)胞液濃度的溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)．
（2）為了便于在顯微鏡下對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質(zhì)體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根（填“葉片”或“幼根”）為材料制備的原生質(zhì)體進(jìn)行融合．把兩種原生質(zhì)體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）為進(jìn)一步從染色體水平上檢測(cè)雜種植株，科學(xué)家選取雜種植株根尖進(jìn)行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對(duì)有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)．
（4）為達(dá)到育種目標(biāo)，還需要對(duì)雜種植株進(jìn)行青枯病抗性檢測(cè)以篩選得到抗性馬鈴薯新種．

Answer 1

分析 1、分析圖表：第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果原生質(zhì)的產(chǎn)量不同，故葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度；
2、制備的原生質(zhì)體應(yīng)置于濃度等于細(xì)胞液濃度的溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)；
3、幼嫩的組織分生能力強(qiáng)，易組織培養(yǎng)成功．
4、用植株根尖制作有絲分裂裝片的步驟為：解離→漂洗→染色→制片．

解答 解：（1）①據(jù)表分析，制備原生質(zhì)體的最佳組合是第5組，根據(jù)第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果原生質(zhì)的產(chǎn)量不同，可知：葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度．
②制備的原生質(zhì)體應(yīng)置于濃度或略高于馬鈴薯葉片細(xì)胞液濃度的溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)．
（2）可根據(jù)染色體的形態(tài)和數(shù)目對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質(zhì)體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根為材料制備的原生質(zhì)體進(jìn)行融合．（幼根有分裂增殖能力，能觀察到染色體）把兩種原生質(zhì)體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）為進(jìn)一步從染色體水平上檢測(cè)雜種植株，科學(xué)家選取雜種植株根尖進(jìn)行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對(duì)有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)（因?yàn)橹衅诩?xì)胞中染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，是觀察染色體形態(tài)和數(shù)目的最佳時(shí)期）．
（4）為達(dá)到育種目標(biāo)，還需要對(duì)雜種植株進(jìn)行青枯病抗性檢測(cè)以篩選得到抗性馬鈴薯新種．
故答案為：
（1）①5     果膠酶     ②略高于
（2）幼根      PEG（或“聚乙二醇”）
（3）解離、漂洗    有絲分裂中
（4）青枯病

點(diǎn)評(píng) 本題考查了根據(jù)圖表獲取有效信息，推測(cè)實(shí)驗(yàn)變量的能力、原生質(zhì)體的制備、雜種細(xì)胞的鑒定方法、雜種植株的篩選等關(guān)知識(shí)，要求考生具有一定的審題和推理能力，難度中等．