Question

【題目】酸奶、泡菜的制作都離不開乳酸菌，其代謝產(chǎn)物乳酸菌素（小分子蛋白質(zhì)）和柚皮中的柚皮精油均有抑菌作用，兩者的提取及應用如圖所示。

（1）某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。分離純化乳酸菌時，首先需要用________對泡菜濾液進行梯度稀釋，分離純化時應挑選出_____________的菌落作為候選菌。若用稀釋涂布平板法統(tǒng)計單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目______，原因是_________________________________________________。

（2）通常不用水中蒸餾法提取柚皮精油，是因為_________________________________________，該過程得到的糊狀液體可通過__________初步除去其中的固體物和殘渣。

（3）抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈。可通過測定透明圈的____________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

Answer 1

【答案】無菌水 有透明圈 少 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 原料容易焦糊和有效成分會發(fā)生部分水解 過濾 大小（面積、直徑、數(shù)量）

【解析】

結(jié)合題干信息，為了分離純化乳酸菌，得到單菌落，防止雜菌感染，應用無菌水稀釋，通過涂布平板法達到目的。在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離；分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。水中蒸餾柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，有效成分檸檬烯容易水解，常用壓榨法提取柚皮精油。

（1）由于泡菜濾液中，乳酸菌的濃度過高，因此若直接培養(yǎng)難以得到單一菌落，進而影響后續(xù)實驗效果。為了避免其他菌類影響實驗效果，因此在進行泡菜濾液梯度稀釋時應使用無菌水。乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸，乳酸會溶解選擇培養(yǎng)基中碳酸鈣而出現(xiàn)透明圈，所以分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計乳酸菌的數(shù)目，測得的數(shù)目是菌落數(shù)，而一個菌落可能是由一個活細胞或幾個聚集在一起的活細胞增殖而成的群體。當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以用稀釋涂布平板法統(tǒng)計單位體積泡菜液中乳酸菌的數(shù)量，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。

（2）水中蒸餾法容易導致原料焦糊和有效成分水解，如果利用水中蒸餾法柚皮易發(fā)生焦糊現(xiàn)象，而且有效成分檸檬烯容易水解，因此一般采用壓榨法提取柚皮精油�？赏ㄟ^過濾法初步除去壓榨液中的固體物和殘渣。

（3）抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，可通過測定以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈的大小來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果，透明圈越大，抑菌效果越好。