Question

【題目】我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗，其有效成分是一種叫做乙肝表面抗原的蛋白質(zhì)（S蛋白），對應的基因為s基因。請回答：

（1）在構建重組DNA分子時，要用限制性核酸內(nèi)切酶處理_________，并用_________酶使兩者結合。將重組DNA分子導入到哺乳動物細胞，經(jīng)篩選得到工程細胞。

（2）在細胞培養(yǎng)過程中，工程細胞在生長過程中有_________現(xiàn)象，需要定期使用_________酶處理，以便于分瓶培養(yǎng)。

（3）為提髙工程細胞培養(yǎng)的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）

A.取單個細胞進行培養(yǎng) B.加入胰島素 C.二氧化碳培養(yǎng)箱 D.加入動物血清

（4）由于哺乳動物細胞培養(yǎng)較難，成本較高，近些年科學家們又發(fā)明了“乳腺生物發(fā)生器”，進而從轉(zhuǎn)基因動物的乳汁中提取所需產(chǎn)品。在這種技術中，作為重組DNA分子受體細胞的一般是__________________。

Answer 1

【答案】 s基因和載體DNA DNA連接 接觸抑制 胰蛋白 A 受精卵

【解析】試題分析：基因工程的一般操作步驟有：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與表達。動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（1）在構建重組DNA分子時，要用限制性核酸內(nèi)切酶處理s基因和載體DNA，并用DNA連接酶將兩者連接起來。

（2）在動物細胞培養(yǎng)過程中存在接觸抑制現(xiàn)象，需要定期使用胰蛋白酶處理，以便于分瓶培養(yǎng)。

（3）取單個細胞進行培養(yǎng)不會提髙工程細胞培養(yǎng)的成功率，A錯誤；胰島素能促進血糖進入組織細胞，因此提髙工程細胞培養(yǎng)的成功率，應該在培養(yǎng)基添加胰島素，B正確；動物細胞培養(yǎng)時需要一定的氣體環(huán)境，因此需要放在二氧化碳培養(yǎng)箱，C正確；動物細胞培養(yǎng)時，為了給細胞提供充足的營養(yǎng)，需要在培養(yǎng)基中加入動物血清，D正確。

（4）培育轉(zhuǎn)基因動物時，應該以受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高。