Question

【題目】如圖是科學(xué)家利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的部分過程。請(qǐng)結(jié)合相關(guān)知識(shí)回答問題：

（1）除圖示方法獲得目的基因（人胰島素基因）外，還可通過________的方法獲得目的基因。

（2）圖示所獲得的人胰島素基因在大腸桿菌中不能表達(dá)，需要質(zhì)粒為其提供________、終止子等調(diào)控因子，質(zhì)粒含有一個(gè)或多個(gè)________切割位點(diǎn)，供目的基因插入其中；質(zhì)粒上還含有________，供重組DNA的鑒定和選擇。

（3）圖中切割人胰島素基因和質(zhì)粒的酶（酶A）相同，其目的是________，將重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌后，常需用________技術(shù)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA。

Answer 1

【答案】人工合成 啟動(dòng)子 限制酶 標(biāo)記基因 獲得相同的末端 分子雜交

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1.目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

3.將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

4.目的基因的檢測(cè)與鑒定：
（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；
（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）獲取目的基因的方法除題圖所示方法外，還有人工合成法。

（2）圖示所獲得的人胰島素基因由于不含啟動(dòng)子和終止子，因此需要運(yùn)載體——質(zhì)粒提供，質(zhì)粒上含有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供目的基因插入其中，質(zhì)粒上還含有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

（3）用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，以便獲得相同的黏性末端。通常通過分子雜交技術(shù)來檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA。