【題目】回答下列(一)、(二)小題:

(一)自生固氮菌是一種能獨(dú)立固定氮?dú)獾募?xì)菌,其中有些好氧種類能產(chǎn)生PHB(一種生物可降解的熱塑性塑料)。現(xiàn)欲從活性污泥中分離、純化、篩選出高產(chǎn)PHB的固氮菌,操作流程如下:采集土樣→富集培養(yǎng)→分離、純化培養(yǎng)→初步篩選PHB固氮菌→篩選高產(chǎn)PHB固氮菌→保存?zhèn)溆。?qǐng)回答:

(1)富集培養(yǎng)時(shí),為達(dá)到篩選自生固氮菌的目的,在配制培養(yǎng)液時(shí)不應(yīng)添加___________。培養(yǎng)時(shí)要將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上振蕩培養(yǎng),其目的是為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供。

(2)用于篩選高表達(dá)量菌株的方法之一是經(jīng)涂布分離獲得__________。進(jìn)行分離、純化培養(yǎng)時(shí),要先將培養(yǎng)基倒入__________中,制成平板,此時(shí)所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時(shí)有所不同,添加了一定量的__________。

(3)在純化過(guò)程中,在固體培養(yǎng)基上劃線時(shí),下列操作正確的是__________。

A.接種環(huán)采用70%酒精滅菌

B.接種時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行

C.劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連

D.劃線分離時(shí),需要把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進(jìn)行接種

(二)下圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的部分過(guò)程,請(qǐng)回答:

(1)若甲、乙細(xì)胞是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合時(shí),首先需將___________消化除去。獲得的丁細(xì)胞在植物組織培養(yǎng)是通過(guò)平衡___________配比進(jìn)行調(diào)控,從而實(shí)現(xiàn)植物器官、組織的發(fā)生和形態(tài)建成。

(2)若該過(guò)程是制備癌胚抗原單克隆抗體的部分過(guò)程,實(shí)驗(yàn)中首先將___________注入小鼠體內(nèi),然后從產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠脾臟中獲取經(jīng)免疫的___________細(xì)胞,將其與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出___________細(xì)胞。

(3)若甲、乙細(xì)胞到丙細(xì)胞過(guò)程是哺乳動(dòng)物體外受精過(guò)程,甲、乙細(xì)胞能夠結(jié)合的基礎(chǔ)是細(xì)胞膜表面有特異性___________功能的蛋白。若丁細(xì)胞為囊胚的外表扁平細(xì)胞,由其組成的結(jié)構(gòu)稱為___________。

【答案】 含氮物質(zhì)(氮源)充足的氧氣 單菌落 培養(yǎng)皿 瓊脂糖 B 細(xì)胞壁 植物激素 癌胚抗原 B淋巴 雜交瘤 識(shí)別 滋養(yǎng)層

【解析】由題干可知該題考查微生物的純化和培養(yǎng)及細(xì)胞融合想知識(shí),主要考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記、理解掌握程度。

、(1)因?yàn)橐蛛x固氮菌,所以可以選用不加氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選。而培養(yǎng)時(shí)要將裝有培養(yǎng)液的錐形瓶放置在搖床上振蕩培養(yǎng),其目的是為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供充足的氧氣。

(2)用于篩選高表達(dá)量菌株的方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法,都是為了獲得單菌落,所以經(jīng)涂布分離可以獲得單菌落。制平板時(shí)需要將滅過(guò)菌的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中進(jìn)行凝固。此時(shí)所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時(shí)有所不同,添加了一定量的瓊脂,因?yàn)楦患囵B(yǎng)基是液體,而此時(shí)的是固體,需要添加凝固劑瓊脂。

(3)在純化過(guò)程中,在固體培養(yǎng)基上劃線時(shí),一定要注意嚴(yán)格無(wú)菌條件,其中接種環(huán)采用灼燒滅菌,A錯(cuò)誤。接種時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行,B正確。劃線時(shí)最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線不能相連,C錯(cuò)誤。劃線分離時(shí),需要把接種環(huán)接觸到培養(yǎng)基中進(jìn)行接種,而不能深入到培養(yǎng)基中,D錯(cuò)誤。

、(1)若甲、乙細(xì)胞是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合時(shí),首先需將具有保護(hù)作用的細(xì)胞壁用纖維素酶和果膠酶去掉,才能獲得原生質(zhì)體。獲得的丁細(xì)胞即雜種植物細(xì)胞在植物組織培養(yǎng)是通過(guò)平衡植物激素主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)配比進(jìn)行調(diào)控,從而實(shí)現(xiàn)植物器官、組織的發(fā)生和形態(tài)建成。

(2)若該過(guò)程是制備癌胚抗原單克隆抗體的部分過(guò)程,實(shí)驗(yàn)中首先將抗原即癌胚抗原注入小鼠體內(nèi),然后從產(chǎn)生免疫反應(yīng)的小鼠脾臟中獲取經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞,將其與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出既能產(chǎn)生特異性抗體還能大量增殖的雜交瘤細(xì)胞。

(3)若甲、乙細(xì)胞到丙細(xì)胞過(guò)程是哺乳動(dòng)物體外受精過(guò)程,甲、乙細(xì)胞能夠結(jié)合的基礎(chǔ)是細(xì)胞膜表面有特異性識(shí)別功能的蛋白。若丁細(xì)胞為囊胚的外表扁平細(xì)胞,由其組成的結(jié)構(gòu)稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞,內(nèi)部是具有發(fā)育全能性的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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(1)由圖可知,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),培養(yǎng)液中葡萄糖和氨基酸含量 , 尿素含量 . 由于在原培養(yǎng)液中沒(méi)有尿素,推測(cè)其是的產(chǎn)物.
(2)培養(yǎng)液中的氨基酸進(jìn)入細(xì)胞后,其主要作用是;被吸收的葡萄糖主要通過(guò)作用,為細(xì)胞提供
(3)轉(zhuǎn)氨酶是肝細(xì)胞內(nèi)參與氨基酸分解與合成的一類酶,正常情況下這類酶不會(huì)排出胞外,若在細(xì)胞培養(yǎng)液中檢測(cè)到該類酶,可能的原因是
(4)由(1)和(3)可初步判斷,細(xì)胞膜對(duì)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)具有的特性.

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