Question

【題目】如圖為某質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動(dòng)子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)．又知植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)．若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．已知耐旱基因兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)．據(jù)圖回答：

（1）獲得耐旱基因常用基因文庫(kù)法．理論上，_________________（填基因文庫(kù)種類）中含有該生物的全部基因；而_________________（填基因文庫(kù)種類）中含有生物的部分基因．將含有耐旱基因的DNA與該質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產(chǎn)物有_________種。

（2）將上述連接產(chǎn)物導(dǎo)入無任何抗藥性的宿主細(xì)胞后，將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能正常生長(zhǎng)的宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是___________________________。

（3）目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是_______________，其合成的產(chǎn)物是_______________。

（4）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是_______________。

（5）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了_______________________（填“同染色體的一條上”或“同染色體的兩條上”）。

Answer 1

【答案】 基因組文庫(kù) cDNA文庫(kù) 3（或6） 載體-載體連接物（或質(zhì)粒-質(zhì)粒連接物） 啟動(dòng)子 mRNA EcoRⅠ和BamHⅠ 同染色體的一條上

【解析】試題分析：

（1）基因組文庫(kù)中含有該生物的全部基因，cDNA文庫(kù)中含有生物的部分基因。將含有耐旱基因的DNA與該質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產(chǎn)物有：目的基因-載體連接物、質(zhì)粒-質(zhì)粒連接物、目的基因-目的基因連接物（或包括這3種連接順序相反的另三種），故是3（或6）種。

（2）能正常生長(zhǎng)的宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是載體-載體連接物（或質(zhì)粒-質(zhì)粒連接物），保證了tctR——四環(huán)素抗性基因的完整，并能正常表達(dá)。

（3）目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)在DNA上，是啟動(dòng)子，其合成的產(chǎn)物是mRNA。

（4）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ。

（5）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了同染色體的一條上，相當(dāng)于一對(duì)基因的雜合體自交。