Question

16．毒死蜱（C₉H₁₁C₁₃NO₃PS）是一種有機(jī)磷殺蟲劑，長期使用將導(dǎo)致土壤中農(nóng)藥殘留嚴(yán)重．某研究小組從長期施藥的韭菜溫室土壤（偏酸性）里分離出能降解毒死蜱的木霉，并對(duì)其降解特性進(jìn)行初步研究．請(qǐng)回答：
（1）用于分離木霉菌種的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．配制此培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入毒死蜱作為唯一碳源．接種前，將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落，以確定培養(yǎng)基是否被污染．
（2）純化木霉時(shí)，統(tǒng)計(jì)出0.2mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為10⁵的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè)，則每mL樣液中的菌落數(shù)為2×10⁷個(gè)．用此法測(cè)定木霉數(shù)量，實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量多，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落．
（3）探究pH對(duì)木霉降解毒死蜱活性的影響
①研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100mg/L 毒死蜱，5天后檢測(cè)毒死蜱的殘留量（圖1）．由圖可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱穩(wěn)定性較好．

②研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100mg/L 毒死蜱，再分別接種1mL木霉懸液，混合均勻，5天后檢測(cè)毒死蜱的殘留量（圖2）．在此韭菜溫室土壤中，若要提高木霉對(duì)毒死蜱的降解活性，可對(duì)土壤作何處理？適當(dāng)提高土壤的pH至7左右．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
其中，稀釋涂布平板法可用于計(jì)數(shù)活菌．

解答 解：（1）要分離出能降解毒死蜱的木霉，需要以毒死蜱作為唯一碳源培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存，其它微生物都不能生存，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．接種前，將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落，以確定培養(yǎng)基是否被污染．
（2）純化木霉時(shí)，統(tǒng)計(jì)出0.2mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為10⁵的平板上的平均菌落數(shù)為40個(gè)，則每mL樣液中的菌落數(shù)為40×$\frac{1}{0.2}{×10}^{5}$=2×10⁷個(gè)．用此法測(cè)定木霉數(shù)量，由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此實(shí)際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)量多．
（3）①由圖1可推知：在偏酸性的土壤中，毒死蜱穩(wěn)定性較好．
②由圖2可知，在此韭菜溫室土壤中，若要提高木霉對(duì)毒死蜱的降解活性，可適當(dāng)提高土壤的pH至7左右．
故答案為：
（1）選擇   毒死蜱   是否產(chǎn)生菌落
（2）2×10⁷     多      當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
（3）①毒死蜱穩(wěn)定性較好         ②適當(dāng)提高土壤的pH至7左右

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的基本成分、種類及功能；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，掌握微生物計(jì)數(shù)的方法；能分析題圖并從中得出正確的結(jié)論．