Question

1．將天然蝦青素基因?qū)�入番茄�?xì)胞中，獲得富含蝦青素的轉(zhuǎn)基因番茄．回答下列問題：
（1）天然蝦青素能有效清除細(xì)胞內(nèi)的自由基，延緩（細(xì)胞）衰老．
（2）天然蝦青素基因可以從基因組文庫中提取，基因組文庫與cDNA文庫相比，基因中具有啟動(dòng)子和內(nèi)含子．
（3）天然蝦青素基因提取后，一般用PCR技術(shù)擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增過程中，需加熱至90～95℃，其目的是解鏈（為單鏈）；加熱至70～75℃時(shí)，互補(bǔ)鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合（或“Taq”）酶的作用下延伸．
（4）將蝦青素基因?qū)�入番茄�?xì)胞，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法是將目的基因插入Ti質(zhì)粒上的T-DNA，使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞．
（5）檢測(cè)蝦青素基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，采用的方法是抗原-抗體雜交．
（6）番茄細(xì)胞轉(zhuǎn)化成功后，經(jīng)植物組織培養(yǎng)，通過脫分化形成愈傷組織，再分化獲得轉(zhuǎn)基因植株．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）細(xì)胞衰老的原因之一是由于細(xì)胞內(nèi)自由基的增多，故天然蝦青素能有效清除細(xì)胞內(nèi)的自由基，延緩細(xì)胞衰老．
（2）目的基因可以從基因組文庫中提取，基因組文庫與cDNA文庫相比，cDNA文庫中基因不具有啟動(dòng)子和內(nèi)含子．
（3）目的基因體外擴(kuò)增一般用PCR技術(shù)，PCR擴(kuò)增過程中，需加熱至90～95℃使其變性，其目的是使DNA解成單鏈，加熱至70～75℃時(shí)，互補(bǔ)鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的作用下延伸．
（4）將蝦青素基因?qū)�入番茄�?xì)胞，常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法是將目的基因插入Ti質(zhì)粒上的T-DNA，使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞．
（5）檢測(cè)蝦青素基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，采用的方法是抗原-抗體雜交．
（6）番茄細(xì)胞轉(zhuǎn)化成功后，需經(jīng)植物組織培養(yǎng)，通過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)過再分化獲得轉(zhuǎn)基因植株．
故答案為：
（1）（細(xì)胞）衰老
（2）啟動(dòng)子 
（3）解鏈（為單鏈）   熱穩(wěn)定DNA聚合 （或“Taq”）
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化       Ti質(zhì)粒上的T-DNA
（5）抗原-抗體雜交
（6）愈傷組織

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．