Question

9．（1）目的基因最終在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程叫做轉(zhuǎn)化．
（2）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造．如圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造質(zhì)粒時(shí)，要使抗蟲基因能成功表達(dá)，還應(yīng)插入啟動子．
②人工改造質(zhì)粒時(shí)，用限制酶Ⅰ處理，其目的是：
第一，去除和破壞質(zhì)粒上的tms和tmr（基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會促
進(jìn)細(xì)胞的分裂和生長；
第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)確插入．
第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等．
③若用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過②過程改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒．分別在含四環(huán)素或卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長情況是在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長．

Answer 1

分析 1、分析圖解，圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，③表示土壤農(nóng)桿菌感染水稻細(xì)胞，④表示利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物．
2、基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止子．
標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．
啟動子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)．

解答 解：（1）轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，圖中①～④表示該過程．
（2）①啟動子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)．
②圖中看出，tms基因能夠編碼生長素，tmr基因能夠編碼細(xì)胞分裂素，這兩種激素能夠促進(jìn)植物的生長．因此人工改造時(shí)用限制酶Ⅰ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的tmr、tms，保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會引起細(xì)胞的無限分裂和生長；另外只有一個插入位點(diǎn)，也有利于目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)確插入．
③若用限制酶Ⅱ切割改造過的理想質(zhì)粒，質(zhì)粒上的抗四環(huán)素的標(biāo)記基因（tet）就會破壞，所以以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長．
故答案為：
（1）轉(zhuǎn)化     
（2）①啟動子　 
 ②tms和tmr　  目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)確插入
③在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長

點(diǎn)評 本題考查了基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生析圖能力和理解能力，并能夠運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力，難度適中．考生要能夠識記基因工程中的工具酶、基因表達(dá)載體的組成；在分析圖解時(shí)找準(zhǔn)限制酶切割位點(diǎn)；掌握目的基因檢測與鑒定的方面并進(jìn)行運(yùn)用．