Question

紅細(xì)胞是脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過(guò)血液運(yùn)送氧氣的最主要的媒介，含有大量的血紅蛋白時(shí)，我們可以選用動(dòng)物的血液來(lái)提取和分離血紅蛋白，請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
（1）提取和分離血紅蛋白時(shí)，首先對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌以去除雜質(zhì)蛋白，洗滌時(shí)應(yīng)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是

 

．
（2）將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中，加入

 

充分?jǐn)嚢瑁�紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白．
（3）分離蛋白質(zhì)分子的一種常用方法是凝膠色譜法（如圖），是根據(jù)

 

分離蛋白質(zhì)的有效方法．
①a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來(lái)的是

 

，原因是

 

 

．
②裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是

 

．
（4）血紅蛋白提取和分離的程序?yàn)?div id="u9iweun" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

和純度鑒定．

Answer 1

考點(diǎn)：酶活力測(cè)定的一般原理和方法

專題：

分析：熟悉記憶血紅蛋白提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的原理，操作步驟．注意事項(xiàng)．

解答： 解：（1）生理鹽水保持紅細(xì)胞滲透壓的穩(wěn)定而不破碎在未洗凈血漿中雜質(zhì)蛋白前，紅細(xì)胞如果破裂了，就可能是血紅蛋白和雜質(zhì)蛋白混在一起，加大分離難度．  故答案為：防止紅細(xì)胞吸水破裂（2）加蒸餾水是讓細(xì)胞吸水膨脹破裂．細(xì)胞膜主要成分是磷脂，易溶于甲苯等有機(jī)溶劑，加入甲苯能加快紅細(xì)胞破碎并釋放出紅細(xì)胞．  故答案為：蒸餾水和甲苯
（3）凝膠色譜法，根據(jù)相對(duì)分子量大小分離物質(zhì)，分子量大的先分離出來(lái)，分子量小的之后分離出來(lái)．   故答案為：相對(duì)分子質(zhì)量大小
①相對(duì)分子質(zhì)量大的物質(zhì)，無(wú)法進(jìn)入凝膠珠中的通道孔，只能留在凝膠珠之間的空隙中．   故答案為：a   a相對(duì)分子質(zhì)量大，無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移速較快②裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．   故答案為氣泡會(huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．（4）血紅蛋白提取和分離的程序?yàn)椋簶悠诽幚恚�紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白的釋放）、粗分離（分離血紅蛋白溶液、透析）、純化和純度鑒定．  故答案為：樣品處理、粗分離、純化

點(diǎn)評(píng)：本題考查了血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)．意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；