Question

【題目】來那度胺是一種新型免疫調(diào)節(jié)劑，臨床用于腫瘤的治療，研究人員利用腫瘤細(xì)胞HepG2對(duì)其作用機(jī)理進(jìn)行了相關(guān)研究。

實(shí)驗(yàn)材料：來那度胺（細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中用DMSO溶解，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中用橄欖油溶解）、淋巴細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、胰蛋白酶、小鼠等。

（1）實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>________________________。

將貼壁生長(zhǎng)的HepG2細(xì)胞用______處理，調(diào)整至恰當(dāng)?shù)募?xì)胞濃度，分別設(shè)置實(shí)驗(yàn)組合對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組分別加入等量的高劑量（15μmol·L）、中劑量（10μmol·L）、低劑量（1μmol·L）的來那度胺溶液，對(duì)照組加入等量的DMSO溶液。24h后測(cè)定細(xì)胞存活率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。

濃度/μmol·L-1	0	1	10	15
細(xì)胞存活率/%	100. 0	98. 21	97. 12	96. 87

實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明了來那度胺對(duì)HepG2細(xì)胞毒性很小。

（2）實(shí)驗(yàn)二 研究來那度胺的免疫調(diào)節(jié)作用。

實(shí)驗(yàn)組：將HepG2細(xì)胞與___________按一定比例混合，_____________________；

對(duì)照組：_____________________________________________________________________________。

培養(yǎng)一段時(shí)間后統(tǒng)計(jì)各組腫瘤細(xì)胞的凋亡率。統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表，說明__________________。

濃度/μmol·L-1	對(duì)照組	1	10	15
凋亡率/%	3	13. 4	29. 3	55. 3

（3）實(shí)驗(yàn)三 研究來那度胺發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的機(jī)理

取生理狀態(tài)一致的小鼠腋下移植1mL的__________細(xì)胞懸液，1周后取移植成功小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組分別用等量高、中、低劑量組的來那度胺溶液灌胃，對(duì)照組小鼠每次給予______灌胃給藥，連續(xù)給藥14d后處死小鼠，取腫瘤組織進(jìn)行測(cè)量，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織明顯小于對(duì)照組。檢測(cè)相關(guān)物質(zhì)的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)一方面組織內(nèi)輔助性T細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素-2等多種蛋白質(zhì)含量明顯提高，有效促進(jìn)了淋巴細(xì)胞的分裂分化。另一方面T細(xì)胞表面的PD-1蛋白和癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白表達(dá)量________（T細(xì)胞表面的PD-1蛋白和癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白結(jié)合后可以抑制T細(xì)胞的活性，使其無法識(shí)別癌細(xì)胞），兩方面都有效增強(qiáng)了淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷作用。

Answer 1

【答案】研究來那度胺對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性 胰蛋白酶 淋巴細(xì)胞 分別加入高、中、低劑量的來那度胺溶液 將HepG2細(xì)胞與淋巴細(xì)胞按一定比例混合，加入等量的DMSO 來那度胺能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對(duì)HepG2細(xì)胞的殺傷能力，且濃度越高殺傷能力越強(qiáng) HepG2細(xì)胞 等量橄欖油 下降

【解析】

依題文可知，實(shí)驗(yàn)一中要根據(jù)自變量和因變量的內(nèi)容來確定實(shí)驗(yàn)?zāi)康�；�?shí)驗(yàn)二中根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶憣?shí)驗(yàn)步驟時(shí)要遵循單一變量等實(shí)驗(yàn)原則；實(shí)驗(yàn)三中要利用題干信息“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中用橄欖油溶解”解答。

（1）根據(jù)題文可知，實(shí)驗(yàn)一中的自變量是來那度胺的劑量，因變量是HepG2細(xì)胞的存活率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明來那度胺對(duì)HepG2細(xì)胞毒性很小，由此該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯縼砟嵌劝穼?duì)HepG2細(xì)胞的毒性。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用胰蛋白酶處理使其分開，從而調(diào)整細(xì)胞濃度。

（2）依題文可知，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯縼砟嵌劝返拿庖哒{(diào)節(jié)作用，再結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以確定來那度胺能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對(duì)HepG2細(xì)胞的免疫力，所以自變量是來那度胺的有無，因變量是HepG2細(xì)胞的凋亡率。由此實(shí)驗(yàn)組：將HepG2細(xì)胞與淋巴細(xì)胞按一定比例混合，分別加入高、中、低劑量的來那度胺溶液；對(duì)照組：將HepG2細(xì)胞與淋巴細(xì)胞按一定比例混合，加入等量的DMSO；實(shí)驗(yàn)結(jié)論：來那度胺能增強(qiáng)淋巴細(xì)胞對(duì)HepG2細(xì)胞的殺傷能力，且濃度越高殺傷能力越強(qiáng)。

（3）依題文實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯縼砟嵌劝钒l(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的機(jī)理，由此小鼠腋下移植的是HepG2細(xì)胞懸液，從而培育有免疫對(duì)象的實(shí)驗(yàn)鼠。依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍�要遵循單一變量原則，再有“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中用橄欖油溶解”的信息，對(duì)照組小鼠需要每次給予等量橄欖油灌胃給藥。據(jù)題文信息“T細(xì)胞表面的PD-1蛋白和癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白結(jié)合后可以抑制T細(xì)胞的活性，使其無法識(shí)別癌細(xì)胞”“兩方面都有效增強(qiáng)了淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷作用”可知，T細(xì)胞表面的PD-1蛋白和癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白表達(dá)量都下降。