Question

20．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖．請回答相關(guān)問題：

（1）過程①中構(gòu)建重組表達(dá)載體所需要的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和B．（A．DNA聚合酶   B．DNA連接酶   C．逆轉(zhuǎn)錄酶 D．解旋酶）
（2）在過程②中，用胰蛋白酶處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞，置于CO₂恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．
（3）在過程③中，一般用促性腺激素處理供體母牛，使其超數(shù)排卵；對供體母牛和代孕母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理．
（4）從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是早期胚胎體外培養(yǎng)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體；②表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個(gè)細(xì)胞；③表示卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)過程．

解答 解：（1）①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接起來．
（2）過程②表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，從羊的胚胎中取胎兒成纖維細(xì)胞，用胰蛋白酶和膠原蛋白酶處理形成單個(gè)細(xì)胞．培養(yǎng)時(shí)，將培養(yǎng)瓶置于含95%的空氣（維持細(xì)胞代謝）和5%CO₂（維持培養(yǎng)基（液）的pH）的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．
（3）過程③表示卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，要得到更多的卵（母）細(xì)胞需用促性腺激素對動(dòng)物進(jìn)行超數(shù)排卵處理；胚胎移植時(shí)，需要對供受體進(jìn)行同期發(fā)情處理．
（4）從重組細(xì)胞到早期胚胎需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；在胚胎移植時(shí)，可通過胚胎分割技術(shù)獲得更多的胚胎．
故答案為：
（1）B    
（2）胰蛋白酶   CO₂恒溫培養(yǎng)箱   
（3）促性腺激素    同期發(fā)情
（4）早期胚胎體外培養(yǎng)      胚胎分割

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點(diǎn)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．