Question

在基因工程中篩選含有目的基因的重組體常用標(biāo)志補(bǔ)救法．該方法是用pUC18質(zhì)粒作為運(yùn)載體（含編碼β半乳糖苷酶α片段的序列），突變型的大腸桿菌（E?coli）（含編碼β半乳糖苷酶ω片段的序列）作為受體，它們的表達(dá)產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)缺陷互補(bǔ)，有β半乳糖苷酶的活性，能與特異性物質(zhì)結(jié)合生成藍(lán)色化合物（見(jiàn)第一組），這樣就可以利用營(yíng)養(yǎng)突變菌株進(jìn)行篩選重組體．單獨(dú)存在的α和ω片段均無(wú)β半乳糖苷酶的活性，不能與特異性物質(zhì)結(jié)合生成藍(lán)色化合物．根據(jù)圖請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題：

（1）在構(gòu)建重組體pUC18過(guò)程中，它的組成除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、

 

以及

 

，圖中表示目的基因是

 

（填字母）．
（2）重組體pUC18構(gòu)建的目的是

 

．
（3）將重組體pUC18導(dǎo)入突變型的大腸桿菌（E?coli）常用

 

法，早期的基因工程都用原核細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是

 

．
（4）白色菌落出現(xiàn)的原因有

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：基因表達(dá)載體由啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因組成．
構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用．

解答： 解：（1）構(gòu)建的重組體pUC18包括目的基因外，還有啟動(dòng)子，終止子、標(biāo)記基因，比較質(zhì)粒與重組質(zhì)�？芍�，C基因插入質(zhì)粒中，所以目的基因是C．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用．
（3）目的基因?qū)�入微生物需要用Ca²⁺處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞；原核細(xì)胞具有繁殖快，代謝旺盛，基因表達(dá)產(chǎn)物易分離，常用來(lái)作為基因工程的受體細(xì)胞．
（4）根據(jù)題意，單獨(dú)存在的α和ω片段均無(wú)β半乳糖苷酶的活性，不能與特異性物質(zhì)結(jié)合生成藍(lán)色化合物，故出現(xiàn)白色的原因是編碼α片段的序列被破壞，不能合成α片段或未導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒，不含編碼α片段的序列，不能合成α片段
故答案為：
（1）終止子   標(biāo)記基因    C
（2）使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用
（3）感受態(tài)轉(zhuǎn)化法   繁殖快，代謝旺盛，基因表達(dá)產(chǎn)物易分離
（4）編碼α片段的序列被破壞，不能合成α片段；未導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒，不含編碼α片段的序列，不能合成α片段

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程，要求學(xué)生識(shí)記基因表達(dá)載體的組成，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的，能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)的生物學(xué)問(wèn)題．