【題目】某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱甲),并將其插入質(zhì)粒P0。構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切點(diǎn)的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。

回答下列問題:

(1)據(jù)圖推斷,該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí),使用了兩種限制酶,這兩種酶是__________。圖中的啟動(dòng)子可作為_______________的結(jié)合位點(diǎn),催動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。

(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀察到了_________,則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成表達(dá);蚬こ痰暮诵牟襟E是______________________

(3)通過___________的方法將目的基因?qū)肱5?/span>________中,再經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng),胚胎移植等過程,獲得含有甲的轉(zhuǎn)基因牛。

(4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的______________ (填"mRNA""總RNA"或"核DNA")作為PCR模板。

【答案】E1和E4 RNA聚合酶 綠色的熒光 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 顯微注射 受精卵 核DNA

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1) 使用E1E4這兩種酶進(jìn)行酶切可以保證目的基因甲的完整性, 圖中的啟動(dòng)子可作為RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。

(2) 在該細(xì)胞中觀察到了綠色的熒光,說明基因已表達(dá),即L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

(3)通過顯微注射的方法將目的基因?qū)肱5氖芫阎,再進(jìn)行體外培養(yǎng)、胚胎移植等相關(guān)操作獲得轉(zhuǎn)基因牛。

(4) 為檢測L1-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。PCR技術(shù)是體外DNA復(fù)制技術(shù),故在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板 。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問題。

1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_________________________________________,這種培養(yǎng)基屬于_____________培養(yǎng)基。

2目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的___________________________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩,培養(yǎng),由此推測目的菌的代謝類型是_______________________

3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中,獲得純凈目的菌的關(guān)鍵是_______________________________

4)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中目的菌的總數(shù),他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進(jìn)行平板劃線,每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看,還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是__________________________,此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是__________________________________________。

5)有同學(xué)將目的菌破碎并提取得到該菌蛋白質(zhì),之后一同學(xué)利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的_______________________________以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)則利用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)(下圖),他在操作中加樣的正確順序是___________________。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí),用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是______________________________________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】在體外用14C標(biāo)記半胱氨酸t(yī)RNA復(fù)合物中的半胱氨酸(Cys),得到*CystRNACys,再用無機(jī)催化劑鎳將其中的半胱氨酸還原成丙氨酸(Ala),得到*AlatRNACys(見下圖,tRNA 不變)。如果該*AlatRNACys參與翻譯過程,那么下列說法正確的是

A. 在一個(gè)mRNA 分子上可以同時(shí)合成多條被14C標(biāo)記的多肽鏈

B. 翻譯過程中的酶在細(xì)胞核中合成

C. tRNA有20種,由DNA轉(zhuǎn)錄而來

D. 新合成的肽鏈中,原來Ala 的位置會(huì)被替換為14C標(biāo)記的Cys

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】圖是人小腸上皮細(xì)胞吸收葡萄糖的過程簡圖,其中GLUT2是細(xì)胞膜上的葡萄糖載體,Na+/K+ATPase是鈉鉀ATP酶,據(jù)圖分析下列說法錯(cuò)誤的是:

A. 小腸上皮細(xì)胞面向腸腔的細(xì)胞膜形成較多微絨毛可以增加細(xì)胞膜上載體蛋白的數(shù)量,高效的吸收葡萄糖等營養(yǎng)物質(zhì)

B. 圖中所示的小腸上皮細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)的功能有催化、運(yùn)輸、信息交流和密封細(xì)胞間隙的作用

C. 葡萄糖通過 Na+驅(qū)動(dòng)的葡萄糖同向轉(zhuǎn)運(yùn)載體進(jìn)入小腸上皮細(xì)胞,此運(yùn)輸方式為主動(dòng)運(yùn)輸

D. Na+/K+ATPase也存在神經(jīng)元細(xì)胞膜上,參與了動(dòng)作電位恢復(fù)為靜息電位的過程

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】回答下列問題:

(1)高等植物光合作用中捕獲光能的物質(zhì)分布在葉綠體的___________上,該物質(zhì)主要捕獲可見光中的_________。

(2)植物的葉面積與產(chǎn)量關(guān)系密切,葉面積系數(shù)(單位土地面積上的葉面積總和)與植物群體光合速率、呼吸速率及干物質(zhì)積累速率之間的關(guān)系如圖所示,由圖可知:當(dāng)葉面積系數(shù)小于a時(shí),隨葉面積系數(shù)增加,群體光合速率和干物質(zhì)積累速率均_______。當(dāng)葉面積系數(shù)超過b時(shí),群體干物質(zhì)積累速率降低,其原因是__________________________。

(3)通常,與陽生植物相比,陰生植物光合作用吸收與呼吸作用放出的CO2量相等時(shí)所需要的光照強(qiáng)度________(填”)。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】為了證明腎上腺素和胰高血糖素在血糖調(diào)節(jié)中的作用,研究人員選取若干生理狀態(tài)相同的健康小白鼠(血糖濃度均為0.9g/L)均分成A、B、C三組,分別注射少量且等量的腎上腺素、胰高血糖素溶液和生理鹽水,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖;卮鹣铝袉栴}:

(1)C組注射的生理鹽水中的Na+、Cl-進(jìn)入血漿后所起的主要作用是_____________。實(shí)驗(yàn)中,可利用小白鼠的排尿反射來采集尿液,鑒定尿液中是否出現(xiàn)葡萄糖。完成該反射時(shí),興奮通過突觸以__________________的方式傳遞。

(2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測,A組小白鼠注射腎上腺素后,小鼠體內(nèi)胰島素的分泌量會(huì)增加,原因是____________________________

(3)據(jù)報(bào)道富硒大米有多種保健功能,如增強(qiáng)免疫力、降血糖等。為驗(yàn)證硒能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能,某研究小組用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如下表。

組別

A組

B組

C組

飼喂的飼料

適量含硒的鼠糧

?

等量含免疫增強(qiáng)劑的鼠糧

用羊紅細(xì)胞作為抗原處理小鼠

兩周,測得體內(nèi)抗體的含量

+ + + + +

+

+ + +

注:“+”越多表示抗體含量越高。

實(shí)驗(yàn)過程中,B組小鼠應(yīng)飼喂____________。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,硒增強(qiáng)了小鼠的體液免疫,依據(jù)是_____________________。

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【題目】下列關(guān)于細(xì)胞呼吸方式的敘述,不正確的是(

A.酵母菌在有氧和無氧條件下均能生成CO2,只是生成量不同

B.酵母菌的細(xì)胞呼吸方式有有氧呼吸和無氧呼吸兩種

C.人體成熟的紅細(xì)胞只能進(jìn)行無氧呼吸

D.細(xì)菌等原核生物中有線粒體,可進(jìn)行有氧呼吸

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【題目】某種野生植物有紫花和白花兩種表現(xiàn)型,由A、a和B、b兩對(duì)等位基因控制,已知紫花形成的生化途徑如圖所示,F(xiàn)有基因型不同的兩白花植株雜交,F(xiàn)1植株中紫花:白花=1:1,若將F1中的紫花植株自交,所得F2中紫花:白花=9:7。請(qǐng)回答下列問題:

(1)基因的基本組成單位是__________,A、a和B、b這兩對(duì)等位基因遵循基因的__________定律。

(2)兩親本白花植株的基因型是__________,F(xiàn)1中的紫花植株自交所得F2中白花植株純合子的基因型是_________。

(3)那紫花形成的生化途徑中,若中間產(chǎn)物是紅色(形成紅花),那么基因型為AaBb的植株自交,子一代植株的表現(xiàn)型及比例為______________________________。

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【題目】減數(shù)分裂過程中,著絲點(diǎn)分裂發(fā)生在

A. 減數(shù)分裂間期 B. 同源染色體聯(lián)會(huì)時(shí)

C. 第一次細(xì)胞分裂后期 D. 第二次細(xì)胞分裂后期

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