Question

【題目】某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_________________________________________，這種培養(yǎng)基屬于_____________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的___________________________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩，培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是_______________________。

（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是_______________________________。

（4）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是__________________________，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是__________________________________________。

（5）有同學(xué)將“目的菌”破碎并提取得到該菌蛋白質(zhì)，之后一同學(xué)利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的________________、_______________以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)則利用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)（下圖），他在操作中加樣的正確順序是___________________。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí)，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是______________________________________。

Answer 1

【答案】提供特殊的碳源和氮源，篩選目的菌 選擇 化合物A 異養(yǎng)需氧型 防止外來雜菌入侵 不接種的空白培養(yǎng)基 判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染 帶電性質(zhì)和多少 分子大小 ④①②③ 先收集到的蛋白質(zhì)分子量小，后收集到的分子量大

【解析】

培養(yǎng)基的主要成分：碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子等。

培養(yǎng)基按功能用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

分離蛋白質(zhì)常用凝膠色譜法，根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。

（1）培養(yǎng)基中含化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素，化合物A中可以提供碳源、氮源，只有能篩選高效降解化合物A的目的菌才可以在該培養(yǎng)基上生存，可以篩選目的菌。該培養(yǎng)基以化合物A為唯一碳源、氮源，屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）化合物A 可以為“目的菌”生長提供所需的氮源和碳源。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，另外目的菌利用有機(jī)物A，說明該目的菌屬于異養(yǎng)需氧生物。

（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵，需要做好消毒和滅菌處理。

（4）統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)時(shí)，為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需要用不接種的空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，看該培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（5）一同學(xué)在電泳分離蛋白質(zhì)的過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)和多少、分子大小以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)則利用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)，首先用吸管將透析后的樣品沿管壁加到色譜柱的頂端；加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)。等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口。隨后再加入磷酸緩沖液，連接洗脫瓶進(jìn)行洗脫。加樣的具體順序?yàn)椋孩堍佗冖�。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時(shí)，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)分子量小，后收集到的分子量大。