Question

6．在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)．如圖為獲得抗蟲棉技術(shù)流程．請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定．
（2）A過程需要的酶有限制酶和DNA連接酶．
（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用Ca²⁺處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（4）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過[C]脫分化和[E]再分化．如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉素．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程示意圖，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；B表示用選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌的過程；C表示脫分化過程；D表示愈傷組織，E表示再分化．

解答 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定．
（2）圖中A為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．
（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用Ca²⁺處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（4）植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化過程，即圖中C表示脫分化過程；D表示愈傷組織，E表示再分化．圖中標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因，因此C過程的培養(yǎng)基除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素，以淘汰不含重組質(zhì)粒的細(xì)胞．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建　目的基因的檢測(cè)與鑒定
（2）限制酶　DNA連接酶
（3）Ca²⁺   感受　重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞
（4）脫分化　再分化　卡那霉素

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息答題．