Question

【題目】胰島B細(xì)胞移植是一種有效治療糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向誘導(dǎo)人

羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（hAMSCs）分化成胰島B細(xì)胞�；卮饐�(wèn)題：

（1）取人羊膜組織刮除血塊的上皮細(xì)胞，沖洗后剪碎，然后用 處理，最終制

成hAMSCs懸液，將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞帖壁生長(zhǎng)到一定階段時(shí)，出現(xiàn)

現(xiàn)象，此時(shí)細(xì)胞停止分裂增殖，這時(shí)需要將細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)處理，然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

取傳至第3帶的hAMSCs放入細(xì)胞培養(yǎng)板，同時(shí)加入RPE進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)。該代hAMSCs能

（2）保持細(xì)胞正常的 。誘導(dǎo)分化培養(yǎng)15天后，提取細(xì)胞 ，用胰島素基因探針進(jìn)行分子雜交，可初步檢測(cè)hAMSCs是否分化成胰島B細(xì)胞。

（3）hAMSCs細(xì)胞在RPE作用下，可以定向分化形成具有正常胰島B細(xì)胞功能的細(xì)胞，其根本原因

是 。培養(yǎng)hAMSCs細(xì)胞的培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)成分包括 （至少寫(xiě)兩種）

人體器官移植面臨的主要問(wèn)題有供體器官短缺和免疫排斥，目前臨床通過(guò)使用 抑制T

細(xì)胞的增殖來(lái)提高器官移植的成活率。

Answer 1

【答案】

（1）胰蛋白酶 接觸抑制

（2）核型 mRNA

（3）基因選擇性表達(dá) 糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、血清

（4）免疫抑制劑

【解析】

（1）要制成細(xì)胞懸液應(yīng)用胰蛋白酶或膠原蛋白梅處理。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到一定階段時(shí)，會(huì)出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，細(xì)胞增殖會(huì)停止。

（2）在10代之內(nèi)的一般都能保持正常的細(xì)胞核型。因?yàn)槭菣z測(cè)是否分化成胰島B細(xì)胞，所以應(yīng)提取mRNA，在胰島B細(xì)胞中有特有的mRNA。

（3）細(xì)胞分化的根本原因是基因的選擇性表達(dá)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)成分包括糖類(lèi)、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽還有天然成分血清或血漿。

（4）對(duì)于抑制T細(xì)胞的增殖可以使用免疫抑制劑，從而減弱細(xì)胞免疫來(lái)提高器官移植的成活率。

	動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)	動(dòng)物體細(xì)胞核移植
原理	細(xì)胞增殖	動(dòng)物細(xì)胞核的全能性
過(guò)程
結(jié)果	獲得細(xì)胞群	獲得克隆動(dòng)物
應(yīng)用	①生產(chǎn)生物制品 ②用于基因工程 ③檢測(cè)有毒物質(zhì)	①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良種繁育 ②保護(hù)瀕危物種 ③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 ④提供克隆器官、組織等