Question

【題目】酵母菌是發(fā)酵工程常用的微生物，在日常生活中也有廣泛應(yīng)用。某興趣小組為了研究酵母菌種群數(shù)量的變化規(guī)律，進(jìn)行了相關(guān)研究實驗，圖1為實驗流程，圖2為根據(jù)實驗測得數(shù)據(jù)繪制的曲線圖。請據(jù)圖回答：

(1)搖床又稱為自動振蕩器，培養(yǎng)時需將錐形瓶置于搖床上進(jìn)行震蕩的目的是______________

(2)若本實驗使用的是如下規(guī)格的血球計數(shù)板，左下是一塊血球計數(shù)板正面示意圖，右下為計數(shù)板規(guī)格圖，該血球計數(shù)板上有________個計數(shù)室，在計數(shù)時一般采用_____________法進(jìn)行取樣計數(shù)。若制備裝片時，將清潔干燥的血球計數(shù)板先在計數(shù)室上滴一滴酵母菌液，靜置5 min再蓋上蓋玻片，測量的結(jié)果會_____________。

(3)顯微觀察時在調(diào)焦清楚后，若發(fā)現(xiàn)只能看到血球計數(shù)板的橫線而看不到豎線，此時應(yīng)____

(4)顯微計數(shù)時發(fā)現(xiàn)所選取的樣方中方格內(nèi)酵母菌總數(shù)為零，可能的原因有(多選)（______）

A. 樣液中酵母菌數(shù)量過少

B. 樣液稀釋的倍數(shù)過大

C. 樣液取自于未搖勻的上清液

D. 實驗過程中部分酵母菌死亡

(5)分析圖2實驗數(shù)據(jù)得知，在0～7 d之間酵母菌的數(shù)量呈________增長：超過7d之后，由于_________________________________________________原因，酵母菌種群數(shù)量呈下降趨勢。

Answer 1

【答案】搖晃震動可以增加培養(yǎng)液中的溶氧量，利于酵母菌和反應(yīng)底物的充分結(jié)合 2 五點取樣 偏高 調(diào)節(jié)反光鏡和光圈，將視野調(diào)暗 ABC “S型” 營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗、代謝廢物的積累、培養(yǎng)液pH的變化

【解析】

探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化的實驗原理：
（1）酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況。
（2）利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細(xì)胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目。

(1) 搖床又稱為自動振蕩器，培養(yǎng)時需將錐形瓶置于搖床上進(jìn)行震蕩的目的是搖晃震動可以增加培養(yǎng)液中的溶氧量，利于酵母菌和反應(yīng)底物的充分結(jié)合。

(2) 由圖可知該血球計數(shù)板上有2個計數(shù)室，在計數(shù)時一般采用五點取樣法進(jìn)行取樣計數(shù)。先將培養(yǎng)液滴加到血球計數(shù)板的計數(shù)室中再蓋上蓋玻片計數(shù)，由于已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴(yán)密的蓋到計數(shù)板表面上，使計數(shù)室內(nèi)的體積增大，從而使計數(shù)結(jié)果偏高。故制備裝片時，應(yīng)先蓋蓋玻片再滴培養(yǎng)液。

(3) 顯微觀察時在調(diào)焦清楚后，若發(fā)現(xiàn)只能看到血球計數(shù)板的橫線而看不到豎線，說明對光不準(zhǔn)確，此時應(yīng)該調(diào)節(jié)反光鏡和光圈，將視野調(diào)暗。

（4）顯微計數(shù)時發(fā)現(xiàn)所選取的樣方中方格內(nèi)酵母菌總數(shù)為零，可能的原因有：樣液中酵母菌數(shù)量過少、樣液稀釋的倍數(shù)過大、樣液取自于未搖勻的上清液；而實驗過程中部分酵母菌死亡，死亡的酵母菌仍然存在于視野中，不會出現(xiàn)視野中酵母菌總數(shù)為0，故ABC符合題意，D不符合題意。

(5) 分析圖2實驗數(shù)據(jù)得知，在0～7d之間酵母菌的數(shù)量呈“S型”增長；超過7d之后，由于營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗、代謝廢物的積累、培養(yǎng)液pH的變化原因，酵母菌種群數(shù)量呈下降趨勢。