Question

16．供體細胞的抗原決定基因能編碼抗原或與抗原形成的關的酶，導致器官移植過程中出現(xiàn)免疫排斥．科學家利用基因工程方法對豬的基因組進行改造，以解決人體移植器官的短缺和免疫排斥問題．回答下列問題：
（1）對豬基因組進行改造，可以選擇某種有調控作用的目的基因，重組后導入愛體細胞，以達到抵制豬抗原決定基因表達（轉錄/轉錄和翻譯/編碼抗原/編碼與抗原形成有關的酶）的目的．進行DNA重組時需要使用的工具酶是限制酶DNA連接酶．
（2）選擇豬胚胎干細胞作為受體細胞，胚胎干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞．將目的基因導入后，利用標記基因的作用篩選（鑒定/選擇）含有目的基因的受體細胞．
（3）將含有目的基因的胚胎干細胞注入豬囊胚，而后將囊胚通過胚胎移植技術移入受體子宮，獲得轉基因豬．
（4）采用核移植技術克隆轉基因豬時，應選用處于MII中（減數(shù)第二次分裂中期）期的卵母細胞作為受體細胞；隨后從構建的重組胚胎中分離得到胚胎干細胞，經誘導分化形成多種器官，這是利用了胚胎干細胞的發(fā)育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被誘導分化形成新的組織細胞特性）．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）．胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞．另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造．

解答 解：（1）對豬基因組進行改造，可以選擇某種有調控作用的目的基因，重組后導入愛體細胞，以達到抵制豬抗原決定基因表達的目的，采用轉基因豬的器官進行移植時就不會發(fā)生免疫排斥反應．構建基因表達載體時，首先需要用同種限制酶切割外源DNA分子和運載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA分子．
（2）胚胎干細胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞．標記基因的作用是篩選含有目的基因的受體細胞．
（3）將含有目的基因的胚胎干細胞注入豬囊胚，而后將囊胚通過胚胎移植技術移入受體子宮，獲得轉基因豬．
（4）采用核移植技術克隆轉基因豬時，應選用處于MII中（減數(shù)第二次分裂中期）期的卵母細胞作為受體細胞；胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性．
故答案為：
（1）表達（轉錄/轉錄和翻譯/編碼抗原/編碼與抗原形成有關的酶）  限制酶 DNA連接酶 
（2）早期胚胎  原始性腺  篩選（鑒定/選擇）
（3）胚胎移植
（4）MII中（減數(shù)第二次分裂中期）   發(fā)育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被誘導分化形成新的組織細胞特性）

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎干細胞的來源及特點，掌握相關工程技術的應用，能結合所學的知識準確答題．