Question

【題目】為探究細(xì)菌間的相互作用，科研人員利用基因工程技術(shù)，對無法利用乳糖的大腸桿菌進(jìn)行改造。

（1）將乳糖酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，獲得營養(yǎng)菌（能利用乳糖）；將抗生素CRO降解酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，獲得抗性菌。將得到的兩種菌分別接種于__________培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（2）將兩種菌分別用__________進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后用__________法單獨(dú)接種于加入含CRO并以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中， 培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，推測兩種菌___________（填“發(fā)生”或“未發(fā)生”）可遺傳變異。若將兩種菌混合接種，則培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)皿中有菌落長出，且同時(shí)含有兩種菌，推測兩種菌實(shí)現(xiàn)了“互利共生”。

（3）為進(jìn)一步探究上述現(xiàn)象的原因，科研人員設(shè)計(jì)了圖1所示裝置進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

①在接種了營養(yǎng)菌和抗性菌混合菌液的培養(yǎng)板左側(cè)，加入含__________的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基可從左側(cè)逐漸擴(kuò)散到混合菌液培養(yǎng)板上。定期檢測混合菌液培養(yǎng)板上兩種菌的數(shù)量，得到圖2所示結(jié)果。

②0~10 h，營養(yǎng)菌的數(shù)量變化是__________。

③10~45 h，營養(yǎng)菌和抗性菌的變化趨勢是二者均顯著增加并逐漸__________，其原因是__________。

Answer 1

【答案】液體 無菌水 涂布 未發(fā)生 ①CRO并以乳糖為唯一碳源 ②近培養(yǎng)基端（相對距離0~500之間）數(shù)量顯著減少，遠(yuǎn)培養(yǎng)基端（相對距離500~1000之間）略有增長 ③向近培養(yǎng)基端（相對距離0的方向）增殖 抗性菌增殖，降解了CRO，使?fàn)I養(yǎng)菌能存活并增殖；營養(yǎng)菌增殖，分解乳糖，代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供碳源

【解析】

1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、接種微生物常用的兩種方法：

①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。

②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

（1）微生物的擴(kuò)大培養(yǎng)需要接種在液體培養(yǎng)基中。

（2）稀釋細(xì)菌用無菌水進(jìn)行梯度稀釋，用涂布平板的方法接種于培養(yǎng)基，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，說明兩種菌都不能生存，即未發(fā)生變異。

（3）①根據(jù)第（2）的分析由于在含CRO并以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中，沒有微生物生長，所以在接著的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該在左側(cè)加入含CRO并以乳糖為唯一碳源進(jìn)行培養(yǎng)。

②0~10h，營養(yǎng)菌的曲線近培養(yǎng)基端（相對距離0~500之間）數(shù)量顯著減少，遠(yuǎn)培養(yǎng)基端（相對距離500~1000之間）略有增長。

③10~45h從圖中看出營養(yǎng)菌和抗性菌在近基端的數(shù)目都在不斷增加，所以二者都在向近培養(yǎng)基端（相對距離0的方向）增殖，營養(yǎng)菌不能再含CRO的地方生存，但抗性菌可以，所以可能的原因是抗性菌增殖，降解了CRO，使?fàn)I養(yǎng)菌能存活并增殖；營養(yǎng)菌增殖，分解乳糖，代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供碳源，二者是互利的關(guān)系。