Question

2．圖中甲是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點．

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，可以只用EcoR I同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優(yōu)點在于可以防止產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接產(chǎn)物．
（2）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶．重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了篩選．
（3）從分子水平簡述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是DNA（人乳鐵蛋白基因）轉(zhuǎn)錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質(zhì)（人乳鐵蛋白）．
（4）該雌性轉(zhuǎn)基因牛經(jīng)與普通雄性個體交配所產(chǎn)的雌性后代是否也能分泌含人乳鐵蛋白的乳汁？為什么？不一定，因為該雌性轉(zhuǎn)基因牛產(chǎn)生的卵細胞中可能含人乳鐵蛋白基因，也可能不含．

Answer 1

分析 分析圖甲：①表示將目的基因?qū)�入受精卵；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示胚胎移植過程；④表示妊娠；⑤表示轉(zhuǎn)基因奶牛產(chǎn)生目的基因產(chǎn)物．
分析表格：已知一線性DNA序列共有5000bp，線性DNA經(jīng)A酶切割后形成2100bp、1400bp、1000bp、500bp共4個片段，說明酶A有3個切割位點；再經(jīng)B酶切割后，2100bp被切割成了1900bp和200bp，1400bp被切割成了800bp和600bp，1000bp和500bp沒有被切割，說明酶B有2個切割位點．

解答 解：（1）只使用EcoR I，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用DNA連接酶連接時，會導(dǎo)致質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化；而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時，不會產(chǎn)生自身環(huán)化．
（2）將目的基因和運載體連接起來需要DNA連接酶的催化．重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了篩選含有重組DNA的受體細胞．
（3）雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是DNA（人乳鐵蛋白基因）轉(zhuǎn)錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質(zhì)（人乳鐵蛋白）．
（4）該雌性轉(zhuǎn)基因牛相當(dāng)于雜合子，因此該雌性轉(zhuǎn)基因牛產(chǎn)生的卵細胞中可能含人乳鐵蛋白基因，也可能不含，其與普通雄性個體交配所產(chǎn)的雌性后代也不一定能分泌含人乳鐵蛋白的乳汁．
故答案為：
（1）產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接產(chǎn)物
（2）DNA連接   篩選
（3）DNA（人乳鐵蛋白基因）轉(zhuǎn)錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質(zhì)（人乳鐵蛋白）
（4）不一定．因為該雌性轉(zhuǎn)基因牛產(chǎn)生的卵細胞中可能含人乳鐵蛋白基因，也可能不含

點評 本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的限制酶的作用特點、啟動子的功能、目的基因?qū)�入動物細胞的方法等相關(guān)知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．