Question

2．請回答與微生物分離和培養(yǎng)有關的問題：
（1）稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是①②④③（填序號）．為減少誤差，在設置平板是一般要3個或以上數(shù)目平板；若統(tǒng)計出在稀釋倍數(shù)為10⁵的平板上的平均菌落數(shù)為30個，所用稀釋液的體積為0.2ml，則每克樣品中的菌落數(shù)為1.5×10⁷個．
①土壤取樣
②稱取10g土壤加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液
③吸取0.1mL溶液進行涂布平板
④依次稀釋至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀釋度
（2）無菌技術主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染．其中對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法分別是高壓蒸汽滅菌；要求實驗操作應在酒精燈火焰旁進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．
（3）如圖是某同學對萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實驗的結果．圖中實驗組是B、C，實驗得出的結論是萃取樣品中不含β-胡蘿卜素．

Answer 1

分析 自然界中目的菌株的篩選的依據(jù)是根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找．實驗室中目的菌株的篩選的原理是利用選擇培養(yǎng)基人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．
微生物的滅菌方法主要有高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌和灼燒滅菌．接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答 解：（1）分離純化土壤微生物的正確的操作步驟：①土壤取樣，②制備土壤溶液，④制備土壤樣品稀釋液，③涂布平板分離．所以正確的操作順序是①②④③．為減少偶然誤差，在設置平板是一般要3個或以上數(shù)目平板；根據(jù)公式可知每克樣品中的菌落數(shù)為：30÷0.2×10⁵=1.5×10⁷個．
（2）微生物培養(yǎng)中，培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，培養(yǎng)皿等器具可以使用干熱滅菌．為避免雜菌污染，接種時需要在酒精燈火焰旁進行．
（3）據(jù)圖分析：A、D兩點不是標準樣品的點樣位置，B、C兩點不是實驗樣品的點樣位置，圖中實驗組色素開始的終點與標準樣品不一致，所以樣品中不含β-胡蘿卜素．
故答案為：
（1）①②④③3個   1.5×10⁷個
（2）高壓蒸汽滅菌    酒精燈火焰旁
（3）B、C   萃取樣品中不含β-胡蘿卜素

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)、篩選與分離，意在強化學生對相關知識的理解與運用，題目難度中等．