科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄的培育過程示意圖。
(1)若圖中Ⅱ是科學家構(gòu)建的魚抗凍蛋白基因的表達載體，則該基因表達載體的組成包括_______、_______、_______、______等。
(2)科學家常采用_______法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。通常采用_______技術檢測目的基因是否插入了番茄的基因組。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可將成熟的番茄果實細胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解為半乳糖醛酸，從而導致果實軟化。抑制PG酶的活性可以延長番茄果實儲藏期，請用文字描述采用蛋白質(zhì)工程技術降低該酶活性的一般過程。
(1)目的基因    啟動子    終止子    標記基因
(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化    DNA分子雜交
(3)蛋白質(zhì)工程方法的步驟為：①．PG酶蛋白的功能分析；②．PG酶蛋白的結(jié)構(gòu)預測和設計；③．PG酶基因的改造；④．改造后的基因表達出新蛋白。
練習冊系列答案
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科目：高中生物 來源：2010年山東師大附中高三最后一次�？祭砜凭C合能力測試（生物）試題 題型：單選題

科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶                  分別對            進行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為             種。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有           作為標記基因。
（3）研究人員通常采用        法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。通常采用      技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)。
（4）利用組織培養(yǎng)技術將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的               過程。

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科目：高中生物 來源：2013屆浙江省臺州中學高三第一次統(tǒng)練生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（6分）科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖作答：
 
（1）在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶＿＿＿＿＿＿＿＿分別對＿＿＿＿進行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為          、         種。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿作為標記基因。
（3）研究人員通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)。

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年湖北武漢五校高二下學期期中統(tǒng)考生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（10分）科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶___________和限制酶___________分別對___________（2分）和質(zhì)粒進行切割。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有______作為標記基因。
（3）研究人員通常采用___________法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)通常采用___________（2分）技術。
（4）利用組織培養(yǎng)技術將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的___________和___________過程。

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科目：高中生物 來源：2014屆福建省高二下學期第一次月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄細胞的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖回答問題。

(1)在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用___________, __________限制酶，分別對_______________, ______________進行切割。

(2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入魚抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體中含有________________________，作為標記基因。

(3)研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。通常采用______________________技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)。

(4)利用組織培養(yǎng)技術將導入魚抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的____________, ______________過程。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆山東濟南外國語學校高二下學期期中考試理科生物試卷（解析版） 題型：綜合題

科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶＿＿＿＿＿＿＿＿分別對_____________________進行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為＿＿＿種。

（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有＿＿＿＿＿＿＿＿作為標記基因。

（3）研究人員通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭毎麅?nèi)。通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿技術，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)。

（4）利用組織培養(yǎng)技術將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的＿＿＿＿  ＿＿＿＿過程。

 

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