科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄的培育過(guò)程示意圖。
(1)若圖中Ⅱ是科學(xué)家構(gòu)建的魚(yú)抗凍蛋白基因的表達(dá)載體，則該基因表達(dá)載體的組成包括_______、_______、_______、______等。
(2)科學(xué)家常采用_______法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用_______技術(shù)檢測(cè)目的基因是否插入了番茄的基因組。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可將成熟的番茄果實(shí)細(xì)胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解為半乳糖醛酸，從而導(dǎo)致果實(shí)軟化。抑制PG酶的活性可以延長(zhǎng)番茄果實(shí)儲(chǔ)藏期，請(qǐng)用文字描述采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)降低該酶活性的一般過(guò)程。
(1)目的基因    啟動(dòng)子    終止子    標(biāo)記基因
(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化    DNA分子雜交
(3)蛋白質(zhì)工程方法的步驟為：①．PG酶蛋白的功能分析；②．PG酶蛋白的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)和設(shè)計(jì)；③．PG酶基因的改造；④．改造后的基因表達(dá)出新蛋白。
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科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶                  分別對(duì)            進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為             種。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體Ⅰ中含有           作為標(biāo)記基因。
（3）研究人員通常采用        法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用      技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。
（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中番茄組織細(xì)胞的               過(guò)程。

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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆浙江省臺(tái)州中學(xué)高三第一次統(tǒng)練生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

（6分）科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：
 
（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶＿＿＿＿＿＿＿＿分別對(duì)＿＿＿＿進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為          、         種。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體Ⅰ中含有＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿作為標(biāo)記基因。
（3）研究人員通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

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（10分）科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶___________和限制酶___________分別對(duì)___________（2分）和質(zhì)粒進(jìn)行切割。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體Ⅰ中含有______作為標(biāo)記基因。
（3）研究人員通常采用___________法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)通常采用___________（2分）技術(shù)。
（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中番茄組織細(xì)胞的___________和___________過(guò)程。

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科目：高中生物 來(lái)源：2014屆福建省高二下學(xué)期第一次月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄細(xì)胞的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。

(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用___________, __________限制酶，分別對(duì)_______________, ______________進(jìn)行切割。

(2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入魚(yú)抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體中含有________________________，作為標(biāo)記基因。

(3)研究人員通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用______________________技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

(4)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入魚(yú)抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中番茄組織細(xì)胞的____________, ______________過(guò)程。

 

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科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①～④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶＿＿＿＿＿＿＿＿分別對(duì)_____________________進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為＿＿＿種。

（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體Ⅰ中含有＿＿＿＿＿＿＿＿作為標(biāo)記基因。

（3）研究人員通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中番茄組織細(xì)胞的＿＿＿＿  ＿＿＿＿過(guò)程。

 

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