【題目】2019617日,新華社發(fā)布《屠呦呦團隊放大招青蒿素抗藥性等研究獲新突破》,屠呦呦團隊近期提出應對青蒿素抗藥性難題的切實可行治療方案,并在青蒿素治療紅斑狼瘡等適應癥方面取得新進展。某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系,讓青蒿素合成過程的某一關鍵酶基因fps在野生青蒿素中過量表達,其過程圖如下:

回答下列問題:

1)圖中酶1____________,酶2分別是____________。利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90-95℃,目的是破壞了DNA分子中的______鍵。在構建重組Ti質(zhì)粒的過程中,需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的____________中。

2)檢驗目的基因是否整合到青蒿素基因組,可以將放射性同位素標記的________________做成分子探針與青蒿素基因組DNA雜交。理論上,與野生型相比,該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿素DNA形成的雜交帶的量_________(填較多或較少)。

3)據(jù)圖分析,農(nóng)桿菌的作用是____________________________________。判斷該課題組的研究目的是否達到,必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿素植株中的________________________。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶 限制酶 T-DNA fps基因、fps基因的mRNA 較多 農(nóng)桿菌可感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中 青蒿素產(chǎn)量

【解析】

基因工程技術的基本步驟:

1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。

2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

1)據(jù)圖示可知,酶1促進逆轉(zhuǎn)錄的過程,故為逆轉(zhuǎn)錄酶,酶2用于切割目的基因和質(zhì)粒,故為限制性核酸內(nèi)切酶,利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90-95℃,目的是破壞了DNA分子中的氫鍵,構建重組Ti質(zhì)粒的過程中,需將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中。

2)檢驗目的基因是否整合到青蒿基因組,可用DNA分子雜交法,即將fps基因、fps基因的mRNA做成分子探針與青蒿基因組DNA雜交。由于產(chǎn)量增高,故與野生型相比,該探針與轉(zhuǎn)基因青蒿DNA形成的雜交帶的量較多。

3)將目的基因?qū)胫参锛毎谐S玫姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,由圖可知,農(nóng)桿菌的作用是感染植物,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞中,判斷該課題組的研究目的是否達到,必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量,若產(chǎn)量增高,則說明達到了目的。

練習冊系列答案
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【題目】1表示人體內(nèi)某些淋巴細胞的分化過程,X表示抗原,數(shù)字表示免疫過程,mn代表相關免疫器官,其余字母表示細胞或物質(zhì)。圖2表示將抗原注射到兔體內(nèi)后抗體產(chǎn)生量的變化。請分析回答下列問題。

1)在圖1中,n表示的場所是________,屬于免疫活性物質(zhì)的有________(填字母)。

2)在圖1中,②和③表示抗原刺激a、c細胞后進行的一系列的增殖分化過程,形成e、dk細胞功能不同的根本原因是________________________________。

3)在圖2中,當注入抗原X,抗體產(chǎn)生量的變化是曲線A。若在第8天同時注射抗原YX,其中表示抗原X刺激機體產(chǎn)生的抗體數(shù)量的曲線是________,判定的依據(jù)是在第8天注射抗原X時刺激了圖1________(填字母),使其迅速增殖分化。

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【題目】下圖為某科研小組采用“基因靶向”技術,對FS細胞進行的遺傳改造。先將小鼠的棕褐毛色基因?qū)牒谏兎N小鼠的胚胎干細胞(FS細胞)中,再將改造后的胚胎干細胞移植回囊胚繼續(xù)發(fā)育成小鼠的過程。據(jù)圖分析不正確的是

A. 第Ⅱ步使用的工具酶是DNA連接酶以及限制酶

B. 完成第Ⅱ步操作,得到由兩個DNA片段連接成的產(chǎn)物,必定是載體與棕褐毛色基因形成的重組DNA分子

C. 第Ⅲ步操作完成后,還需篩選出目的基因已成功導入的胚胎干細胞,并將該胚胎干細胞注射到囊胚中

D. ES細胞除可進行如圖操作外,也可進行冷凍保存

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【題目】質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體,它存在于許多細菌體內(nèi),質(zhì)粒上有標記基因如圖所示,通過標記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點有a、b、c),請根據(jù)表中提供細菌的生長情況,推測①②③三種重組后細菌的外源基因插入點,正確的一組是

細菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長情況

細菌在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況

能生長

能生長

能生長

不能生長

不能生長

能生長

A.①是c;②是b;③是a B.①是ab;②是a;③是b

C.①是ab;②是b;③是aD.①是c;②是a;③是b

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【題目】下圖表示用農(nóng)作物品種①和②兩個品系培育出新品種⑥的多種方法,Ⅰ~Ⅴ表示培育過程,其中抗病和易感病性狀分別由Aa決定,高桿和矮桿性狀分別由Bb決定,請回答:

1)品種①經(jīng)過程Ⅱ培育品種③的原理是_________________。由品種③自交得到的品種⑥在所有子代中所占的比例為________________。

2)品種①和②經(jīng)過程Ⅰ和Ⅴ培育品種⑥的育種方法是__________________。在④的所有子代中取一株抗病矮桿的植株,與品種②進行雜交,子代表現(xiàn)型及比例為__________________。

3)由品種④經(jīng)過過程Ⅲ培育品種⑤常用的方法是_________,由品種④經(jīng)過程Ⅲ和Ⅵ培育品種⑥的原理是____________________________。

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【題目】下列關于人類遺傳病的敘述錯誤的是(

A.各種遺傳病在青春期的患病率很低

B.“選擇放松”造成有害基因的增多是有限的

C.羊膜腔穿刺可用于確診胎兒是否患神經(jīng)管缺陷

D.單基因遺傳病是由染色體上或線粒體中單個基因異常引起的

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【題目】下圖為需氧呼吸的3個階段示意圖,其中①~③表示過程,a~c表示物質(zhì)。下列敘述正確的是(

A.①過程發(fā)生在線粒體基質(zhì)B.②過程有水生成和消耗

C.③過程將有機物中的能量轉(zhuǎn)化為aD.b、c分別是CO2O2

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【題目】為探究單側光對生長素分布的影響,科研工作者利用玉米胚芽鞘做了如下實驗。下列分析不正確的是

A.胚芽鞘的彎曲角度θ可反映瓊脂塊中生長素的含量

B.單側光不影響生長素從胚芽鞘尖端向瓊脂塊的擴散

C.單側光能在有光的一面誘導生長素在光下發(fā)生分解

D.單側光可以引起胚芽鞘中的生長素向背光側轉(zhuǎn)移

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【題目】閱讀下面的材料,完成(1)~(5)題。

科研人員建立了一種新的靶向基因敲除技術——TALEN技術(原理見下圖)。TALEN技術使用的基因敲除工具是由DNA識別域和核酸內(nèi)切酶兩個部分組成的蛋白質(zhì)?茖W家發(fā)現(xiàn)了一種細菌蛋白質(zhì)(TALE),它的二連氨基酸(NI、NG、HD、NN,其中字母N、I、G、H、D分別代表了一種氨基酸)與四種堿基(AG、C、T)有恒定的對應關系:NI識別A,NG識別THD識別C,NN識別G。FokⅠ是一種形成二聚體后具有核酸內(nèi)切酶活性的蛋白單體。因此,可以利用TALE作為DNA識別域,用FokⅠ二聚體定點切斷DNA。

科學家發(fā)現(xiàn)水稻植株無論是否具有光周期敏感蛋白基因P,在短日照條件下均表現(xiàn)為雄性可育。在長日照條件下,具有光周期敏感蛋白的水稻才能雄性可育;P只在單倍體花粉細胞中表達,使其能夠合成淀粉。科研人員使用TALEN技術對水稻基因P進行靶向敲除,以得到光敏雄性不育水稻新品種。

1)在TALEN技術的設計中,選擇使用FokⅠ單體而不直接使用FokⅠ二聚體,這樣能減少對DNA__________切割,保證了基因敲除的靶向性。為了讓TALEN技術能用于各種不同生物、不同基因的敲除,沒有與TALE蛋白結合的FokⅠ二聚體對DNA的切割應__________(選填具有不具有)類似于限制酶的限制性

2)若TALE蛋白左臂所識別的基因P的序列為“-TGACC-” ,則TALE蛋白左臂對應的二連氨基酸序列應為__________。用這種方法,可以確定TALE蛋白的氨基酸序列,進而人工合成TALE蛋白基因。然后將TALE蛋白基因與__________基因進行融合,得到融合基因。

3)科研人員用圖2所示的質(zhì)粒為載體,其中的潮霉素抗性作為標記基因,作用是__________。應選用__________酶將該質(zhì)粒與融合基因構建為重組質(zhì)粒,并將融合基因設法導入到水稻愈傷組織中,再利用__________技術獲得T0代植株。

4)由于基因靶向敲除成功的概率比較低,所以科研人員培育T0代植株時應保證__________日照條件,待其自花受粉得到T1代,再將T1代植株__________,并在開花期隨機選擇一部分植株的花粉進行鑒定,鑒定方法是__________。若觀察到某植株的花粉全部未被染成藍色,則該植株為所需的純合光敏雄性不育新品種。

5)與傳統(tǒng)的雄性不育水稻品種相比,光敏雄性不育新品種的優(yōu)勢在于它能實現(xiàn)自交繁殖并保留雄性不育特性,這是因為__________。

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