Question

【題目】[生物一一選修3：現(xiàn)代生物技術(shù)專題]

Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖：

(1)在培養(yǎng)上皮細(xì)胞時(shí)應(yīng)將其置于含______________的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(2)步驟②中應(yīng)將上皮細(xì)胞與___________細(xì)胞通過核移植技術(shù)構(gòu)建出重組細(xì)胞。

(3)圖中的ES細(xì)胞來源于______________。

(4)該治療需要利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出大量的Rag2基因，假設(shè)Rag2基因的兩條鏈的引物分別稱為引物A和引物B，那么1個(gè)Rag2基因通過PCR技術(shù)擴(kuò)增四輪之后，產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例理論上為_____。某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物的部分堿基序列為：引物A為...CAGGCT...，引物B為...AGCCTG...，請問這組引物的不合理之處是____________。

(5)步驟④的培養(yǎng)基中應(yīng)加入____________以誘導(dǎo)ES細(xì)胞的分化。

Answer 1

【答案】 95%空氣加5%CO2 去核的（MⅡ期的）卵母 (囊胚的）內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 15/16 引物A和引物B會發(fā)生（局部）堿基互補(bǔ)配對而失效 分化誘導(dǎo)因子

【解析】試題分析：熟記并理解動物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)、胚胎干細(xì)胞、基因工程的基本操作程序等相關(guān)的基礎(chǔ)知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上結(jié)合題意并從圖示中提取信息作答。

(1) 在培養(yǎng)上皮細(xì)胞時(shí)，為保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體環(huán)境，應(yīng)將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(2) 在步驟②的核移植過程中，應(yīng)將上皮細(xì)胞與去核的（MⅡ期的）卵母細(xì)胞通過核移植技術(shù)構(gòu)建出重組細(xì)胞。

(3) 圖中的ES細(xì)胞來源于(囊胚的）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。

(4) 1個(gè)Rag2基因通過PCR技術(shù)擴(kuò)增四輪之后，得到16個(gè)DNA分子，其中不含引物A的DNA片段只有一個(gè)，所以產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例理論上為15/16。某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物，引物A和引物B中的第3、4個(gè)堿基會發(fā)生堿基互補(bǔ)配對而導(dǎo)致失效。

(5) 步驟④的培養(yǎng)基中應(yīng)加入分化誘導(dǎo)因子以誘導(dǎo)ES細(xì)胞的分化。