Question

【題目】以下是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡圖。

（1）上圖中過程①的完成采用的方法有:_____________，依據(jù)的生物學(xué)原理_____________。

（2）過程④要用到的酶有_____________，過程⑥采用的方法叫_____________。

上圖中的質(zhì)粒本身含有氨芐青霉素抗性基因和M、N兩種限制酶（兩種酶切割序列完全不同）切割位點(diǎn)。若用限制酶M和N切割，通過凝膠電泳分離，分析得到下表。

分子量(kb)	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	8.0	9.0	10.0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+	+		+
凝膠電泳結(jié)果（1kb=1000對(duì)堿基，+表示檢測(cè)到該片段的存在）

（3）該質(zhì)粒長度為___________kb，在該質(zhì)粒中，M酶與N酶的切割點(diǎn)分別有__________、_______個(gè)。

（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是_______________________________________。

Answer 1

【答案】 用物理方法（離心、振動(dòng)、電刺激）、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒 細(xì)胞膜具有流動(dòng)性 逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶 感受態(tài)法 16 3 2 作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）

【解析】試題分析：本題以“制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡圖”為情境，綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程、生產(chǎn)單克隆抗體等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。以圖示中的箭頭和文字信息為切入點(diǎn)，圍繞基因工程操作的基本程序、生產(chǎn)單克隆抗體的過程明辨圖中數(shù)字所示的生理過程、字母所示的細(xì)胞名稱。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題圖中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問題的解答。

(1) 過程①是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，采用的方法有:用物理方法（離心、振動(dòng)、電刺激）、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。

(2) 過程④為逆轉(zhuǎn)錄，要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶。過程⑥為將構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，最常用的轉(zhuǎn)化方法是用CaCl2或Ca2+處理，增大細(xì)胞壁的通透性,使其成為感受態(tài)細(xì)胞，即采用的方法叫感受態(tài)法。

(3)上圖中的質(zhì)粒為環(huán)狀DNA。表中信息顯示：單獨(dú)用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3個(gè)片段，說明有3個(gè)酶M的切割點(diǎn)；單獨(dú)用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2個(gè)片段，說明有2個(gè)酶N的切割點(diǎn)。綜上分析，該質(zhì)粒長度為1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。

(4) 氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）。