生長激素在治療激素分泌過少的矮小癥方面有積極的作用．為了批量生產(chǎn)生長激素，可以采取轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制生長激素合成的基因轉(zhuǎn)移到微生物細胞內(nèi)．圖1是涉及此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的幾種限制酶識別序列及其割位點；
下面圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶對質(zhì)粒和供體DNA的切割位點：

請回答下列問題：
（1）四種酶切位點相比較，SmaI酶切位點結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定，原因是
 
．
（2）用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用限制酶
 
切割，原因是
 
．
（3）為了檢測基因轉(zhuǎn)入的成功，需要在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入
 
，若微生物能正常生長，說明轉(zhuǎn)入成功．
考點：基因工程的原理及技術(shù)
專題：
分析：DNA分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是指DNA分子雙螺旋空間結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性．因為
 C 
.
G
有三對氫鍵，而
 A 
.
T
含有二對氫鍵，因此DNA分子中堿基對
 C 
.
G
越多，DNA結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定．基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心．需要同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使它們露出相同的末端，才可以用DNA連接酶連接成基因表達載體．基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因．標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因．
解答： 解：（1）四種酶切位點相比較，SmaI酶切位點中含有的堿基對
 C 
.
G
最多，
 C 
.
G
有三對氫鍵，因此SmaI酶切位點結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定．
（2）目的基因和質(zhì)粒的抗性基因中含有SmaI酶切位點，因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，不能使用限制酶SmaI．
（3）根據(jù)質(zhì)粒中抗性基因是抗生素抗性基因，因此基因轉(zhuǎn)入是否成功，可以在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入抗生素．若微生物能正常生長，說明轉(zhuǎn)入成功；否則，不成功．
故答案為：
（1）堿基C-G具有三對氫鍵
（2）SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因
（3）抗生素
點評：本題綜合考查了基因工程和DNA分子結(jié)構(gòu)的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實際，綜合運用所學知識解決自然界和社會生活中的一些生物學問題的能力．
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相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

“三鹿奶粉事件”讓人們認識到利用“測氮法”檢測蛋白質(zhì)含量存在著明顯的缺陷．實驗室中鑒定蛋白質(zhì)的試劑及顏色反應(yīng)分別是（　�。�
A、斐林試劑 磚紅色
B、二苯胺試劑  藍色
C、健那綠  藍綠色
D、雙縮脲試劑 紫色

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科目：高中生物 來源： 題型：

[生物--現(xiàn)代生物科技專題]
科學家已成功將人α一抗胰蛋白酶基因?qū)肷窖�，可通過轉(zhuǎn)基因山羊分泌的乳汁來生產(chǎn)人α一抗胰蛋白酶．培育該轉(zhuǎn)基因山羊的基本過程如下：

（1）基因表達載體構(gòu)建過程中須有
 
工具酶．
（2）將基因表達載體導入山羊受精卵的最常用有效的方法是
 
．
（3）山羊受精卵一般要培養(yǎng)到
 
階段，才能植入母體．
（4）早期胚胎植入母體的技術(shù)稱為
 
．
（5）要檢測轉(zhuǎn)基因山羊分泌的乳汁是否含有人α一抗胰蛋白酶，可采用
 
方法．

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科目：高中生物 來源： 題型：

請依據(jù)所做的相應(yīng)實驗，回答下列問題：
Ⅰ．依據(jù)“檢測生物組織中是否含還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)”的實驗．完善如表：
待檢物質(zhì) 所用試劑 顏色顯現(xiàn)
蛋白質(zhì)
 
 
脂肪
 
 
還原糖
 
 
Ⅱ．了探究酵母菌的呼吸作用方式，某同學將實驗材料和用具按下圖安裝好．據(jù)圖回答：

（1）甲、乙兩組實驗中，探究酵母菌有氧呼吸的是
 
組．
（2）甲、乙兩組澄清的石灰水都變渾濁，說明都有
 
產(chǎn)生．
（3）從上述實驗得出：酵母菌的呼吸作用方式為
 
．
A．只進行有氧呼吸   B．只進行無氧呼吸     C．既能進行有氧呼吸又能進行無氧呼吸．

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科目：高中生物 來源： 題型：

根據(jù)免疫學知識回答下列問題：在防疫工作中，從破傷風患者體內(nèi)獲得血清，給未注射過破傷風類毒素的人在發(fā)生深度外傷時注射，也能治療或緊急預(yù)防，請你設(shè)計實驗來加以證明．
實驗材料：一批體重60g左右，大小及健康狀況相近的小白鼠，注射器等器材．
①實驗原理是
 

②實驗步驟：第一步：
 
；第二步：
 

③預(yù)期結(jié)果：
 
．

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科目：高中生物 來源： 題型：

科學家將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達．過程如下圖，據(jù)圖回答：
（1）過程（1）表示的是采取
 
的方法來獲取目的基因．
（2）圖中（2）所示含有目的基因的DNA（質(zhì)粒）的形成需要的酶包括：
“分子手術(shù)刀”：
 

“分子縫合針”：
 

質(zhì)粒在基因工程中的作用是作為
 
的載體，
 
也可以作為載體．
（3）圖中（3）過程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞內(nèi)，一般將受體大腸桿菌用
 
處理，使細胞成為
 
，使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進入受體細胞．檢測大腸桿菌B是否導入了質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，若細菌能夠生長，說明：已導入了重組質(zhì)�；�
 
因為：
 
．
（4）基因工程的第四步工作中，檢測目的基因是否插入受體細胞的DNA上要用到技術(shù)．

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科目：高中生物 來源： 題型：

如圖是利用定點突變技術(shù)獲取人們所需蛋白質(zhì)的過程示意圖．請據(jù)圖分析回答相關(guān)問題：

（1）該圖示過程體現(xiàn)了
 
（至少寫出兩項）等現(xiàn)代生物技術(shù)的綜合運用．
（2）當前基因工程中擴增目的基因常用的方法是
 
，圖中
 
（填寫圖中序號）過程即為此項應(yīng)用．
（3）Ⅳ過程需使用的酶是
 
，它具有的重要特性是
 
；Ⅴ過程的最終完成必須依賴于酶的作用．
（4）從理論上分析，經(jīng)過Ⅶ過程可提供人們所需蛋白質(zhì)的細胞占總數(shù)的
 
．
（5）一個基因表達載體的組成除了目的基因外，還必須有、以及
 
．

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科目：高中生物 來源： 題型：

原先曾栽種于缺磷培養(yǎng)液中的植物，在磷酸鹽溶液中對磷酸鹽的攝入情況如圖所示．圖中X代表當有氣體氮通入磷酸鹽溶液時植物對磷酸鹽的攝入情況，Y代表當有空氣通入磷酸鹽溶液時植物對磷酸鹽的攝入情況．下列的哪種解釋最能說明此圖所示的結(jié)果（　�。�
A、空氣的加入提高了磷酸鹽的氧化速度
B、主動運輸?shù)某跏茧A段之后跟隨著一個被氮抑制的緩慢擴散
C、在氮存在的條件下，快速擴散的初始階段之后是主動運輸
D、氮的加入阻止了磷酸鹽的吸收

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科目：高中生物 來源： 題型：

甲種子萌發(fā)時釋放CO2的量大于吸入O2的量，乙種子萌發(fā)時吸入O2的量大于釋放CO2的量，最可能的原因是（　　）
A、甲的呼吸底物有糖類和脂肪，乙的呼吸類型為有氧呼吸和無氧呼吸并存
B、甲的呼吸類型為有氧呼吸和無氧呼吸并存，乙的呼吸底物有糖類和脂肪
C、甲的無氧呼吸強度大于有氧呼吸強度，乙的呼吸消耗脂肪的量大于糖類
D、甲的呼吸消耗脂肪的量大于糖類，乙的無氧呼吸強度大于有氧呼吸強度

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