Question

14．回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)和分離的問題．
（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源、無機(jī)鹽四類，培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)PH的先后順序是先調(diào)PH，后滅菌．
（2）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（3）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作．
該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量．在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長(zhǎng)，最可能的原因是接種環(huán)溫度過高，菌被殺死．
（5）玉米秸稈中的纖維素可被某些微生物分解，分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合物，其中的葡萄糖糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖，在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物．用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的透明圈．

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，其基本過程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個(gè)步驟．
2．微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，一般可用于計(jì)數(shù)活菌數(shù)量．
3、纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖．
剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源、無機(jī)鹽四類，培養(yǎng)基配制時(shí)，基本過程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板五個(gè)步驟．
（2）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（3）采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（4）三塊平板有兩塊平板長(zhǎng)有菌落，說明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；而其中一塊未見菌落，說明菌株死亡．因此，應(yīng)在接種過程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過高被殺死．
（5）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中葡萄糖糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖；剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．
故答案為：
（1）氮源和無機(jī)鹽        先調(diào)PH，后滅菌
（2）血細(xì)胞計(jì)數(shù)板       稀釋涂布平板
（3）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格
（4）接種環(huán)溫度過高，菌被殺死
（5）纖維二糖     紅    透明圈

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)以及纖維素分解菌的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的基本成分以及培養(yǎng)基的制備過程，掌握微生物分離與純化的方法，識(shí)記纖維素酶的種類以及對(duì)應(yīng)的水解產(chǎn)物，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．