Question

17．Bt毒蛋白基因是應用最為廣泛的抗蟲基因．請回答下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因抗蟲植物的問題：
（1）要從蘇云金芽孢桿菌中獲取Bt毒蛋白基因，可根據(jù)Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設(shè)計特異性引物（對），再利用PCR技術(shù)擴增出Bt毒蛋白基因．
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因為Ti質(zhì)粒上具有T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA），它能把目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上．這種將目的基因?qū)�入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產(chǎn)生了相應毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測．要確定抗蟲基因?qū)�入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體生物學水平上還需要做抗蟲接種實驗．
（4）目前，轉(zhuǎn)基因植物的安全性問題是社會爭論的熱點．面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，我們應持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�、诨�因表達載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)�入受體細胞④目的基因的檢測與鑒定．
2、目的基因的檢測與鑒定
（1）分子水平上的檢測  
  ①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
  ②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
  ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答 解：（1）要在體外大量擴增目的基因可利用PCR技術(shù)，該技術(shù)需要引物，即根據(jù)Bt毒蛋白基因的部分已知序列，設(shè)計特異性引物（對）．
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．
（3）若要檢測具有抗蟲基因的棉花是否產(chǎn)生了相應毒蛋白，在分子水平上可利用抗原-抗體雜交方法進行檢測；要確定抗蟲基因?qū)�入棉花細胞后，是否賦予了棉花抗蟲特性，在個體水平上還需要做抗蟲接種實驗．
（4）面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，我們應持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食．
故答案為：
（1）引物（對）   PCR
（2）T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）　  染色體DNA     農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
（3）抗原-抗體雜交    抗蟲接種
（4）趨利避害，不能因噎廢食

點評 本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；區(qū)分識記目的基因?qū)�入受體細胞的不同方法；掌握目的基因檢測與鑒定的方法；明確抗蟲植物研究的生態(tài)學意義．