Question

9．草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機制是抑制植物體內EPSPS酶的合成，最終導致植物死亡．但是，它的使用有時也會影響到農作物的正常生長．目前，已發(fā)現可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉入農作物植物細胞內，從而獲得的轉基因植物就能耐受高濃度的草甘膦．
（1）下圖A-F表示6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經過了轉基因處理，但是否成功還未知．若ABC澆清水，DEF澆的水中含有草甘膦，上述DEF植物中，肯定能健康成長的是E．

（2）限制酶是基因工程必需的工具酶，其作用是能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．
（3）將圖1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應管中有4種DNA片段．
（4）假設圖1中質粒原來BamHⅠ識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶BclⅠ的堿基序列，現用BclⅠ和HindⅢ切割質粒，則該圖1中①的DNA右側還能選擇BamHⅠ進行切割，并能獲得所需重組質粒嗎？能請說明理由切割后露出的黏性末端相同．
（5）若上述假設成立，并成功形成重組質粒，則重組質粒D
A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切開
B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切開
C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切開
D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切開
（6）圖2中不同組織細胞的相同DNA進行過程③時啟用的起始點（在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中選擇），其原因是不完全相同不同組織細胞中基因會進行選擇性表達．
（7）要想檢測導入的EPSPS基因是否表達，在分子水平上可用抗原-抗體雜交方法進行檢測．

Answer 1

分析 第（1）題的關鍵信息是“植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經過了轉基因處理，但是否成功還未知．”，再根據題干中的處理方法進行判斷即可．
由于HindⅢ與BamHⅠ兩種限制酶酶切形成的黏性末端不一樣，圖中①中的DNA同時被這兩種限制酶切割后產生四種基因片段，即_B、HB、BH、B_ （H表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）．
圖2表示基因的表達，DNA轉錄形成信使RNA（α鏈），翻譯形成多肽鏈．

解答 解：（1）A-C澆的是清水，因此都能健康成長．D-F澆的水中含有草甘膦，其中D對草甘膦敏感，不能健康成長；E對草甘膦天然具有抗性，能健康成長；F雖經過了轉基因處理，但是否成功還未知，因此不一定能健康成長．因此，上述DEF植物中，肯定能健康成長的是E．
（2）限制酶的作用是能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．
（3）圖中①的DNA含有兩個BamHⅠ酶的切割位點，含有一個HindⅢ酶的切割位點，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反應管中有4種DNA片段．
（4）據圖分析，由于BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同，質粒原來BamHⅠ識別位點的堿基序列變?yōu)橄拗泼窧clⅠ的堿基序列，用BclⅠ和HindⅢ切割質粒，用BamHⅠ和HindⅢ切割目的基因，仍能獲得重組質粒．
（5）根據酶切位點和識別的堿基序列可知，重組質粒只能被能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切開．
（6）不同組織細胞的相同DNA在轉錄時，如果是相同基因一般轉錄起點相同，不同的基因轉錄起點不同，原因是基因的選擇性表達．
（7）檢測目的基因是否在受體細胞內表達的分子水平上的檢測是向分泌物中加入抗體，通過抗原-抗體特異性結合形成雜交帶加以檢測，如果能形成說明表達，如果不能形成說明沒有表達．
故答案為：
（1）E
（2）能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開
（3）4
（4）能    切割后露出的黏性末端相同         
（5）D
（6）不完全相同    不同組織細胞中基因會進行選擇性表達
（7）抗原-抗體雜交

點評 本題以轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖為載體，考查基因工程的相關知識，意在考查考生的識圖能力、理解能力和應用能力，屬于中等難度題．