Question

4．轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻對于緩解糧食危機具有重要意義．
（1）轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻能有效地殺死特定害蟲，從而降低該種害蟲的種群密度．能達到這個目的手段還有：利用性引誘劑誘殺害蟲種群中的雄性個體，破壞害蟲種群正常的性別比例．
（2）在目的基因小且序列已知的情況下，如果要獲取豇豆細胞中的抗蟲基因，一般是采用化學(xué)合成法的方法．
（3）為了能把該抗病基因轉(zhuǎn)入到細胞中，常用的載體是質(zhì)粒．
（4）基因工程成功的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，得到重組DNA．將連接得到的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后用該農(nóng)桿菌去感染水稻細胞，利用標記基因的表達來鑒定和篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細胞．再利用DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功插入轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定．
第一步：目的基因的獲�。�
原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法．
第二步：基因表達載體的構(gòu)建：
（1）目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用．
（2）組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因．
第三步：將目的基因?qū)�入受體細胞：
轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程．
第四步：目的基因的檢測和表達：
（1）首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)．
（2）其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，方法是用標記的目的基因作探針與mRNA雜交．
（3）最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原--抗體雜交．
（4）有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定．如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀．

解答 解：（1）轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能有效地殺死害蟲，從而降低該種害蟲的種群密度（種群數(shù)量）；利用性引誘劑誘殺害蟲種群中的雄性個體，可以破壞其正常的性別比例，降低種群的出生率，進而降低其種群密度．
（2）在目的基因小且序列已知的情況下，如果要獲取豇豆細胞中的抗蟲基因，一般是采用化學(xué)合成法的方法．
（3）將目的基因?qū)�入植物細胞常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，即借助農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒．
（4）基因工程成功的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，得到重組DNA．將連接得到的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后用該農(nóng)桿菌去感染水稻細胞，利用標記基因的表達來鑒定和篩選出成功導(dǎo)入目的基因的受體細胞．再利用DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功插入轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上．
故答案為：
（1）種群密度    性別比例　  
（2）化學(xué)合成法
（3）質(zhì)粒  
（4）基因表達載體的構(gòu)建    標記基因　DNA分子雜交

點評 本題考查基因工程、種群的特征、植物組織培養(yǎng)技術(shù)，要求考生識記基因工程的操作步驟及應(yīng)用；識記種群的數(shù)量特征，掌握生物防治害蟲的方法；識記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理、過程、條件及應(yīng)用，屬于考綱識記層次的考查．