Question

PCR技術(shù)是把一DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地?cái)U(kuò)增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本過程如下圖所示

圖中 表示每次擴(kuò)增過程中需要的引物（加入足夠多）。每個(gè)引物含20個(gè)核苷酸，并分別與DNA片段兩端堿基互補(bǔ)，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈，還作為子鏈的一部分，不會(huì)從模板鏈上脫落下來，

（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)的            過程。

（2）PCR擴(kuò)增過程中需要對(duì)DNA片段進(jìn)行高溫處理，其目的是                 ，此過程在生物體內(nèi)需           酶的參與，作用部位是DNA的      鍵。

（3）據(jù)圖分析，擴(kuò)增過程中需要的引物有     種，其實(shí)質(zhì)是          ，假如引物都用³H標(biāo)記，從理論上計(jì)算，所得DNA分子中含有³H標(biāo)記的占            。

（4）假定DNA片段含200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計(jì)算還需要提供       個(gè)游離脫氧核苷酸。

Answer 1

（1）DNA復(fù)制

（2）使DNA的兩條鏈彼此分開（或解旋）   解旋   氫

（3）兩  單鏈DNA   100％（2分）

（4）2520（2分）

解析:

最后一小題，從理論上計(jì)算還需要提供2520個(gè)：在PCR擴(kuò)增時(shí)引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶作用下延伸。引物的平均長(zhǎng)度是20bp，擴(kuò)增3次，共新形成7個(gè)子鏈DNA，故為7*400-7*20=2520