Question

（12分）科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄植株的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有Pst I 、Sma I 、Hind III 、Alul 等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（amp^r為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，I 、II 表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請據(jù)圖作答：

（l）基因工程的核心是_______________________________。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用                酶，分別對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA 片段分別為      種和      種。
（3）要篩選已導(dǎo)入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞,應(yīng)首先選擇含                     的培養(yǎng)基中篩選番茄組織細(xì)胞。
（4）研究人員通常采用                       法將魚抗凍蛋白基因?qū)�入番茄�?xì)胞內(nèi).
(5)基因工程操作中的第四步是目的基因的檢測與鑒定,在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)通常采用   __________   技術(shù)，。采用   __________ 方法在個(gè)體生物學(xué)水平上檢測目的基因是否表達(dá)。
(6)圖中③④分別指的是           、           ,欲獲得人工種子應(yīng)培養(yǎng)到___________階段。將II細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體所用技術(shù)的理論基礎(chǔ)是___________________________。

Answer 1

(1) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建
(2) PstI和SmaI   4、2 
(3)氨芐青霉素
(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍法等，答案合理即給分)
(5) 抗原--抗體雜交   低溫培養(yǎng)
（6）脫分化 再分化 胚狀體 植物細(xì)胞的全能性

解析