Question

【題目】下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。請(qǐng)回答：

（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有 （填序號(hào)）。

①標(biāo)記基因

②多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)

③對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害

④啟動(dòng)子

⑤起始密碼子

（2）若對(duì)圖1中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性將會(huì) 。

（3）用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是 （從“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/ HindⅢ”、“SmaⅠ/ HindⅢ”中選擇）。不能選擇其他限制酶的理由分別

是 、 。

（4）圖3中，①常用的導(dǎo)入方法是 ，為了獲得雌性轉(zhuǎn)基因牛，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行 ，③過(guò)程選用的早期胚胎應(yīng)發(fā)育到 階段。

Answer 1

【答案】

（1）①②③④

（2）提高

（3）BamHⅠ/ HindⅢ 若選EcoRⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)；若選SmaⅠ/ HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒(méi)有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)

（4）顯微注射法 性別鑒定 桑椹胚或囊胚

【解析】

（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有①標(biāo)記基因、②多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、③對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害和④啟動(dòng)子，而⑤起始密碼子位于mRNA上。

（2）堿基之間的配對(duì)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，即C-G，A-T，且C和G之間有3個(gè)氫鍵，A和T之間有2個(gè)氫鍵，因此C和G的含量越高，DNA分子熱穩(wěn)定性也越高．SmaⅠ酶切位點(diǎn)中均為C-G堿基對(duì)，因此插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒中的C和G的含量就越高，其熱穩(wěn)定性也越高。

（3）若選EcoRⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)；若選SmaⅠ/HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒(méi)有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)，所以用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ。

（4）過(guò)程①是將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵，所用方法是顯微注射法；為了獲得雌性轉(zhuǎn)基因牛，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；過(guò)程③是將早期胚胎移入代孕母體中所用技術(shù)為胚胎移植，時(shí)期是發(fā)育到桑椹胚或囊胚的早期胚胎。