Question

回答有關(guān)遺傳信息的傳遞和表達(dá)的問題．
肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會引發(fā)肺癌．研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)�入肺癌�?xì)胞實(shí)驗(yàn)表達(dá)，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制．該基因工程技術(shù)基本流程如圖1．請回答下列下列問題．

（1）進(jìn)行過程①時，需用到的酶有

 

．
（2）下列關(guān)于繼續(xù)培養(yǎng)過程的說法錯誤的是

 

（多選）
A．可以用血清或淋巴液作為培養(yǎng)基
B．應(yīng)該將培養(yǎng)溫度控制在37℃左右
C．培養(yǎng)基PH值范圍5.6～5.8
D．培養(yǎng)過程應(yīng)用了細(xì)胞分化的原理
研究發(fā)現(xiàn)，let-7基因能影響RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖2．在基因工程中，通�？梢杂梅肿与s交技術(shù)（即用同位素或熒光標(biāo)記的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交）來判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)．
（3）據(jù)圖2分析，可從細(xì)胞中提取

 

進(jìn)行分子雜交，以直接檢測let-7基因是否轉(zhuǎn)錄．肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中

 

（RASmRNA/RAS蛋白）含量減少引起．
（4）下列四幅圖中能正確反映目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物內(nèi)部結(jié)構(gòu)的是

 

．
TSS：轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，TTS：轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子

（5）研究人員用DNA測序儀顯示了RAS基因某片段的堿基排列序列圖片．其中圖3的堿基排列順序已經(jīng)解讀，堿基順序是：GGTTATGCGT，請解讀圖4顯示的堿基排列順序：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖1：圖1表示利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)�入肺癌�?xì)胞的流程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示用胰蛋白酶處理組織細(xì)胞，使之成為單個細(xì)胞，再加細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的過程．
分析圖2：圖2表示let-7基因影響癌基因RAS的表達(dá)的原理，let-7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細(xì)胞中的RAS蛋白含量減少，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖受到抑制．

解答： 解：（1）圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需用到的酶有限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶．
（2）A．繼續(xù)培養(yǎng)過程可以用血清或淋巴液作為培養(yǎng)基，A正確；
B．繼續(xù)培養(yǎng)過程應(yīng)該將培養(yǎng)溫度控制在37℃左右，B正確；
C．培養(yǎng)基PH值范圍7.35～7.45，C錯誤；
D．培養(yǎng)過程應(yīng)用了細(xì)胞增殖的原理，D錯誤．
本題選錯誤的，故選：CD．
（3）判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來檢測，從細(xì)胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交．根據(jù)題中信息“肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會引發(fā)肺癌”知，導(dǎo)入let-7基因后，肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制；據(jù)圖2可知，let-7基因影響RAS基因表達(dá)的機(jī)理是：let-7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細(xì)胞中的RAS蛋白含量減少，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖受到抑制．
（4）在目的基因的起始端有啟動子，末端有終止子，因此轉(zhuǎn)錄形成的mRNA初始位置為TSS（轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)），在末端位置有TTS（轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)）；同時mRNA將作為蛋白質(zhì)合成的直接模板，因此其中含有起始密碼子和終止密碼子控制翻譯過程的進(jìn)行，兩個密碼子分別位于TSS內(nèi)側(cè)和TTS內(nèi)側(cè)．故選：D．
（5）圖3為DNA測序儀顯示的某真核生物DNA片段一條鏈的堿基排列順序圖片．圖3的堿基排列順序已經(jīng)解讀，其順序是：GGTTATGCGT，所以圖中堿基序列應(yīng)從下向上讀，且由左至右的順序依次是ACGT，所以圖4中堿基序列為：GATGCGTTCG．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶
（2）CD
（3）RNA（說明：不能具體寫圖2中的某種RNA----若能直接提取就沒有檢測的必要了）       RAS蛋白
（4）D
（5）GATGCGTTCG

點(diǎn)評：本題以圖形為載體，主要考查基因工程的原理和技術(shù)、遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯、DNA分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)等相關(guān)知識，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力，有一定的難度．