Question

請分析回答下列有關(guān)基因工程問題：

Ι 基因工程是按人們預(yù)先設(shè)計的藍圖，將目的基因通過一定方法導(dǎo)入到另一種生物的細胞中，使之產(chǎn)生符合人類需要的新的遺傳性狀或創(chuàng)造出新的生物類型的現(xiàn)代技術(shù)。

57.基因工程常用的三種工具為限制性內(nèi)切酶、　　　　　　 、質(zhì)粒，通常選擇質(zhì)粒作為“目的基因的運輸載體”是由于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

58.基因工程一般包括四步：獲取目的基因；目的基因與運載體重組；　　　　　　　 ；

　　　　　　　　　 　　。

Ⅱ 在基因工程中通常需要利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理與細胞內(nèi)DNA復(fù)制類似，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR如右圖示，包括三個基本反應(yīng)步驟：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加 熱至93℃左右一定時間后雙鏈解離；②模板DNA與引 物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板--引物結(jié)合物；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的脫氧核苷酸鏈。重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得較多的目的基因。

59.溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板--引物結(jié)合物時所遵循的原則是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

60.在PCR技術(shù)中，引物的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

61.從理論上推測，第三輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物B的DNA片段所占比例為　　　　　　　　 。

62.下圖表示利用PCR技術(shù)獲取目的基因X的第一次循環(huán)產(chǎn)物。則至少需要在　　　 輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)獨立且完整的的X基因。如果經(jīng)過n次循環(huán)，則產(chǎn)物中①所示DNA分子數(shù)為　　　　　　 。

63.用限制酶EcoRV、MboI單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到DNA片段長度如下圖（1kb即1000個堿基對），請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、MboI的切割位點。

Answer 1

57.DNA連接酶   質(zhì)粒能進入并停留在受體細胞，甚至能整合到受體細胞DNA上；質(zhì)粒能進行自我復(fù)制；質(zhì)粒能在受體細胞中表達；質(zhì)粒上通常含有標記抗性基因    58.重組DNA分子導(dǎo)入受體細胞     篩選含目的基因的受體細胞

59.堿基互補配對    60.能與模板鏈堿基互補配對，引導(dǎo)并作為子鏈合成的起點

61.7/8     62.3     1       63.圖省略（每格1分，共10分）