Question

6．家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力，將人的干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)可以提取干擾素用于制藥．
（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用胰蛋白酶處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常加一定濃度CO₂，其主要作用是：維持培養(yǎng)液的pH．
（2）在此基因操作過程中的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（3）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因基因文庫，若要檢測(cè)干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá)，從分子水平上可以采用的方法是抗原-抗體雜交技術(shù)．若在體外可通過PCR技術(shù)大量獲取該目的基因．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。虎诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
2、PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等．

解答 解：（1）為了使動(dòng)物組織分散開為單個(gè)細(xì)胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理．在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常加一定濃度CO₂，其主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（2）基因工程操作過程中的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體．啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（3）人的干擾素基因一般來自cDNA文庫，其屬于部分基因文庫．基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可采用分子雜交技術(shù)，要檢測(cè)目的基因是否翻譯，可采用抗原-抗體雜交法．若在體外可通過PCR技術(shù)大量獲取該目的基因．
故答案為：
（1）胰蛋白（或膠原蛋白酶）    維持培養(yǎng)液的pH
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建         首端     RNA聚合酶
（3）部分基因      抗原-抗體雜交技術(shù)     PCR

點(diǎn)評(píng) 本題綜合考查基因工程和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．