Question

【題目】土霉素是-種可以治療人類感染性疾病的抗生素類藥物，易溶于乙醇（沸點78.5℃）和丙酮（沸點56℃），溫度高于70℃時土霉素的結(jié)構(gòu)會被破壞，可由土壤中放線菌的發(fā)酵產(chǎn)物中提取�；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：

(1)從土樣中篩選目的菌種并對其計數(shù)時，取樣用的小鏟子和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌，目的是防止外來雜菌的污染以保證______________________。

(2)土壤中放線菌數(shù)目較少，可在梯度稀釋前使用________（從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)和功能分析）培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，此操作可達(dá)到的目的是_______________。當(dāng)培養(yǎng)基上長出菌落后，可觀察菌落的 __________________（至少答兩點）來初步判斷篩得菌種的種類。

(3)分析可知，在使用萃取法從放線菌中提取土霉素時，最好選擇____________作為萃取劑，以防止在__________過程中土霉素被破壞。放線菌除了能產(chǎn)生土霉素外還能產(chǎn)生四環(huán)素等其他抗生素，某同學(xué)對萃取得到的樣品用紙層析法進行鑒定，用顯色劑顯色的結(jié)果如右圖所示，分析圖能否看出萃取樣品中除了含有土霉素外還含有四環(huán)素？_____________，如能看出請說明理由，如不能看出請設(shè)計實驗來證明萃取樣品中是否還含有四環(huán)素（只要求寫出實驗設(shè)計思路）。 _______________________________________。

Answer 1

【答案】 篩選得到的菌種全部來自于土樣 液體選擇 增加目的菌種的數(shù)目 菌落的形狀、大小、隆起程度、顏色等 丙酮 濃縮 不能 利用四環(huán)素的標(biāo)準(zhǔn)樣品作對照，再對萃取樣品進行紙層析法來判斷

【解析】試題從物理狀態(tài)看，培養(yǎng)基分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基等；從功能上看，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基等；選擇培養(yǎng)基是為了篩選所需的微生物種類，淘汰不需要的微生物種類；而鑒別培養(yǎng)基只是通過加入特定物質(zhì)，根據(jù)菌落的特征確定某菌種的存在。用紙層析法進行對比分析，萃取樣品中是否含所要確認(rèn)的成分，則必須準(zhǔn)備在所確認(rèn)成分的標(biāo)準(zhǔn)樣品。

（1）從土樣中篩選目的菌種時，取土樣用的小鏟子和盛土樣的信封都要滅菌，目的是防止外來雜菌的污染，保證篩選得到的菌種全部來自于土樣。

（2）結(jié)合前面的分析，由于土樣中含有多種微生物，而所需的菌種是土樣中某中特定放線菌，所以需要在選擇培養(yǎng)基中才能達(dá)到淘汰和篩選的目的；其次是因為土樣中目的菌種太少，需要擴大目的菌的數(shù)量，為了菌株能充分利用培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分，應(yīng)采用液體培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)。篩選判定目的菌株，需要通過觀察菌落特征，如形狀、大小、隆起程度、顏色等來確認(rèn)。

（3）由于土霉素在70℃時分子結(jié)構(gòu)易被破壞，所以選擇萃取劑時，應(yīng)選沸點低于70℃的丙酮，以防止在濃縮過程中土霉素被破壞。分析該同學(xué)用紙層析法對萃取得到的樣品的分離結(jié)果可知，根據(jù)B、C與A、D的對比只能得出，萃取樣品中含有土霉素，不能得出是否含四環(huán)素。因為在A、D標(biāo)準(zhǔn)樣品中不含四環(huán)素，所以要想確認(rèn)萃取樣品中含有四環(huán)素，需要利用四環(huán)素的標(biāo)準(zhǔn)樣品作對照，再對萃取樣品進行紙層析法來判斷。