2．某班同學(xué)在學(xué)完菊花的組織培養(yǎng)內(nèi)容之后，決定利用課余時(shí)間去實(shí)踐這項(xiàng)技術(shù)，培養(yǎng)出美國(guó)的菊花來美化教室的環(huán)境。

(1)在制備MS固體培養(yǎng)基時(shí)先根據(jù)__________進(jìn)行計(jì)算。MS培養(yǎng)基含有__________種營(yíng)養(yǎng)元素。其中__________6種元素屬大量元素；__________8種元素屬微量元素，能源物質(zhì)是__________。由于菊花的莖段組織培養(yǎng)比較容易，所以不必加__________。

(2)將分裝好的培養(yǎng)基連同培養(yǎng)器械一起進(jìn)行__________滅菌。

(3)選取菊花的__________部分進(jìn)行外植體消毒，在消毒時(shí)既要考慮__________，又要考慮__________，所以分別用__________的酒精和__________的氯化汞消毒，消毒時(shí)間不宜過長(zhǎng)。

(4)接種時(shí)要特別注意__________，每瓶接種__________塊外植體。將接完種的錐形瓶放在__________中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間定期消毒。溫度控制在__________℃并每日用日光燈光照12 h。

(5)若干天后發(fā)現(xiàn)有些錐形瓶中生長(zhǎng)出可愛的菊花幼苗，有的錐形瓶中培養(yǎng)失敗還長(zhǎng)出很多細(xì)菌菌落，試分析其原因。幼苗在移栽入土之前需要進(jìn)行哪些處理工作？

1.根據(jù)下列材料回答問題。

人工種子是人們模仿天然種子結(jié)構(gòu)制造出來的生命有機(jī)體，它能像種子一樣萌發(fā)生長(zhǎng)，長(zhǎng)成植物。人工種子的核心部件是被外層物質(zhì)包埋的具有類似種子胚功能的胚狀體。胚狀體不同于一般的種子胚，是由非合子細(xì)胞分化形成的類似于胚的結(jié)構(gòu)物。胚狀體在一定的條件下，可以通過發(fā)育形成植株。胚狀體可從懸浮培養(yǎng)的單細(xì)胞中得到，也可通過試管培養(yǎng)的愈傷組織、花粉或胚囊獲得。將胚狀體包埋在一個(gè)能提供營(yíng)養(yǎng)的膠質(zhì)中，便成了所謂的“人工種子”。自從1958年F.C.斯圖爾德和J.賴爾特分別對(duì)胡蘿卜進(jìn)行誘導(dǎo)得到胚狀體至今，約有200多種植物培養(yǎng)出了胚狀體。我國(guó)利用組織培養(yǎng)技術(shù)已成功地在煙草、水稻、小麥和玉米等作物上誘導(dǎo)出了胚狀體。各國(guó)正著手將人工種子推向商品化。

(1)植物的胚狀體是__________的產(chǎn)物。培育胚狀體利用了__________這一項(xiàng)生物技術(shù)。

(2)包埋胚狀體的膠質(zhì)可看作種子的______________________________部分。

(3)該項(xiàng)技術(shù)的成功應(yīng)用，反映了細(xì)胞的__________性。

(4)由人工種子萌發(fā)出的植株是否可育？

(5)人工種子的研究和商品化有何意義？

2．(2012·浙江自選)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：

―→―→―→―→

請(qǐng)回答：

(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________色環(huán)帶。

(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是________滅菌。

A．高壓蒸汽                              B．紫外燈照射

C．70%酒精浸泡                  D．過濾

(3)步驟X表示________。在無菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。

(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在________中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致________。

(5)臨床上用¹⁴C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將¹⁴C標(biāo)記的________分解為NH₃和¹⁴CO₂。

1.(2012·山東基本能力)除了高溫加熱以外，其他滅菌方法還有(　　)

A．紫外線照射　　　　　　    B．真空包裝

C．用保鮮膜密閉                     D．添加防腐劑

7．(2011·四川卷—30.Ⅰ)有人通過實(shí)驗(yàn)探究某海藻的最佳培養(yǎng)條件，以獲得最大生物量(注：生物量指單位體積的藻體干重)。

(1)在有光條件下培養(yǎng)海藻時(shí)，培養(yǎng)液中必須含有________，還需定時(shí)向培養(yǎng)液通入空氣，目的是提供________________________。海藻光合速率隨不同光照強(qiáng)度的變化曲線如圖，圖中B點(diǎn)表示最佳的________培養(yǎng)條件。

(2)該海藻在無光條件下仍能生長(zhǎng)，但需在培養(yǎng)液中添加葡萄糖等有機(jī)物，目的是提供______________________________。

(3)向培養(yǎng)液中添加葡萄糖配成不同濃度的培養(yǎng)液，在一定光照條件下培養(yǎng)該海藻，測(cè)定海藻的生物量如下表：

要確定培養(yǎng)海藻的最佳葡萄糖濃度，還需設(shè)計(jì)________的實(shí)驗(yàn)。

(4)綜合上述實(shí)驗(yàn)，獲得該海藻最大生物量的培養(yǎng)條件是

________________________________________________________________________。

6．(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮____________、____________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、____________、____________等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行____________(消毒、滅菌)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和____________；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能____________。

(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的____________。

(4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是

________________________________________________________________________。

(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過____________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

5．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株。篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問題：

(1)②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入__________作為碳源。②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基__________(A.影響；B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量。如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用__________法。

(2)④為對(duì)照，微生物在④中不生長(zhǎng)，在⑤中生長(zhǎng)。④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于____________________；使用__________法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？

________________________________________________________________________。

(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大�。�

(4)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染？

4．在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，常在飼料中加入一定量的尿素來飼養(yǎng)牛等牲畜。因其有特殊的器官——瘤胃，在瘤胃中生活著多種微生物，其中許多微生物以尿素作為唯一氮源。某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)，對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)。

Ⅰ.取樣：到屠宰場(chǎng)，在剛宰殺的牛的瘤胃中取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中密封。

Ⅱ.制備培養(yǎng)基：制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目。由于初次實(shí)驗(yàn)，選擇了一個(gè)較寬的稀釋范圍。并且每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基，1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。

Ⅲ.微生物的培養(yǎng)與觀察：按稀釋度的順序分別吸取 0.1 mL進(jìn)行平板涂布操作。將涂布好的培養(yǎng)皿放在30 ℃下培養(yǎng)，并且需要無氧條件。比較兩種培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量、形態(tài)等，并做好記錄。挑選選擇培養(yǎng)基上不同形態(tài)的菌落接入含酚紅指示劑的培養(yǎng)基中，觀察是否產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

Ⅳ.細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取平板計(jì)數(shù)。

請(qǐng)回答下列問題：

(1)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的目的是什么？

(2)為什么每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基？

(3)上述培養(yǎng)時(shí)，為什么需要無氧條件？

(4)含酚紅的培養(yǎng)基應(yīng)用的目的是什么？結(jié)果會(huì)呈現(xiàn)什么樣的顏色反應(yīng)？原理是什么？

(5)計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選什么樣的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？怎樣計(jì)算出樣品中的細(xì)菌數(shù)目？

3．某學(xué)校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容。首先對(duì)食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理，準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請(qǐng)回答下列問題：

(1)對(duì)買回來的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，首先制備試管培養(yǎng)基，寫出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料：__________、__________、__________、__________、__________。其中提供氮源的是__________；提供碳源的主要物質(zhì)是__________________。

(2)微生物在生長(zhǎng)過程中對(duì)各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的__________。在燒杯中加入瓊脂后要不停地__________，防止__________。

(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個(gè)試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入__________中滅菌，壓力__________kPa，溫度__________，時(shí)間__________。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時(shí)，將試管取出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)______________________。

(4)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意，先向鍋內(nèi)倒入__________。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。

(5)從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意，接種環(huán)要在酒精燈__________(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌，并且待接種環(huán)__________后蘸取菌種，試管口不能離開酒精燈火焰附近，將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長(zhǎng)成菌落后放入__________℃冰箱中保存。

2．現(xiàn)代人吃什么都講究天然，所以目前市場(chǎng)上果汁飲料越來越受到青睞。請(qǐng)回答：

(1)果汁飲料的包裝瓶上寫著105 ℃高溫瞬時(shí)滅菌的意思是____________________，這樣做的目的是____________________。

(2)自己在家中榨的果汁很容易腐敗，而果汁包裝瓶上寫著“不含任何防腐劑，最長(zhǎng)保質(zhì)期為一年”，其中的奧秘是__________。

(3)在果汁加工過程中可添加__________酶來提高出汁率和清澈度。

(4)蘋果醋是最受歡迎的飲料之一，其生產(chǎn)過程中利用了__________的發(fā)酵作用，該過程需控制的溫度條件是__________。

(5)在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中，果醋的制作往往在果酒制作基礎(chǔ)上進(jìn)行，請(qǐng)用相關(guān)反應(yīng)式表示：________________。