Question

【題目】根據(jù)基因工程的有關(guān)知識回答下列問題。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要加入兩種引物，原因是___________________只能從引物的3′端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增，引物I延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸，這樣，DNA聚合酶只能特異地復(fù)制________________________的DNA序列，一個(gè)DNA分子三輪復(fù)制以后，含有兩種引物的DNA分子有________個(gè)。

（2）基因工程的核心步驟是______________________。其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中_________________________________________，并可遺傳給下代。

（3）大腸桿菌作為受體細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用________處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為_______________細(xì)胞。

（4）檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是______________________________________。

Answer 1

【答案】 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（或Taq酶） 處于兩個(gè)引物之間 6 構(gòu)建基因表達(dá)載體 穩(wěn)定存在、表達(dá)和發(fā)揮作用 Ca2+ 感受態(tài) 目的基因是否能轉(zhuǎn)錄形成mRNA

【解析】試題分析：本題考查基因工程的相關(guān)知識，識記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟以及各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，再結(jié)合題意就能準(zhǔn)確答題。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，由于DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈，因此要用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)被擴(kuò)增；引物I延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸，這樣，DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列；一個(gè)DNA分子三輪復(fù)制以后，含有兩種引物的DNA分子有23-2=6個(gè)。

（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，表達(dá)和發(fā)揮作用，并可遺傳給下代。

（3）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。

（4）檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是目的基因是否能轉(zhuǎn)錄形成mRNA。